评估激光诱导脑损伤大鼠模型中的血脑屏障完整性

摘要

来源：Kuts, R. 等．大鼠运动皮层激光诱导脑损伤．J. Vis. Exp. (2020)

本视频演示了在大鼠脑部激光损伤后评估血脑屏障（BBB）完整性的方法。将示踪染料注入尾静脉，使其循环至脑部，并通过受损的血脑屏障渗入脑组织。随后取出脑组织并进行处理以释放染料。通过测量染料的荧光强度，定量分析激光诱导的血脑屏障损伤程度。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 激光诱导脑损伤实验操作步骤

1. 将20只大鼠分配至标记为激光组的实验组，另20只大鼠分配至对照组（假手术组）。
2. 对激光组大鼠进行50的激光照射J 10倍 点 如下所述：
   1. 使用2%异氟烷与氧气混合气体对大鼠进行麻醉，保持自主呼吸。用镊子夹捏大鼠尾部以检查麻醉深度，确认无回缩反射。
   2. 在整个实验过程中，使用直肠温度控制的加热垫维持大....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
50% 三氯乙酸	SIGMA - ALDRICH	76-03-9
脑组织与组织基质	SIGMA - ALDRICH	15013
22 G 静脉套管针 Venflon	KD-FIX	1.84E+11
Sigma 2-16P 离心机	SIGMA - ALDRICH	Sigma 2-16P
紧凑型分析天平	SIGMA - ALDRICH	HR-AZ/HR-A
数字电子秤	SIGMA - ALDRICH	Rs 4,000
解剖剪刀	SIGMA - ALDRICH	Z265969
Eppendorf 移液器	SIGMA - ALDRICH	Z683884
Eppendorf 离心管	SIGMA - ALDRICH	EP0030119460
96% 乙醇	ROMICAL		易燃液体
2% 伊文思蓝	SIGMA - ALDRICH	314-13-6
荧光检测仪	Tecan, Männedorf 瑞士	型号 Infinite 200 PRO 多功能酶标仪
带温度计的加热器	Heatingpad-1	型号：HEATINGPAD-1/2
输液袖带	ABN	IC-500
异氟烷，USP 100%	Piramal Critical Care, Inc	NDC 66794-017
Multiset	TEVA MEDICAL	998702
Olympus BX 40 显微镜	Olympus
培养皿	SIGMA - ALDRICH	P5606
11 号手术刀片	SIGMA - ALDRICH	S2771
Sharplan 3000 Nd:YAG（掺钕钇铝石榴石）激光仪	Laser Industries Ltd
立体定位头架	KOPF	900LS
2 ml 无菌注射器	Braun	4606027V
27 G 注射器针头	Braun	305620