生成脊髓损伤的小鼠模型

所有涉及动物模型的程序都经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审查。

1.手术和非手术器械

1. 的准备在高压灭菌器中对手术和非手术器械进行消毒。
2. 用 70% 乙醇清洁手术台，并将加热垫加热至 37 °C。
3. 将加热垫放在手术台上，并用无菌手术单盖住。
   注意：在所有的生存程序中，这里都使用"无接触"技术来保持无菌。

2. 准备动物并进行 T9-T10 椎板切除术

1. 获取成年 （Balb/c） 10 周龄雄性小鼠。使用吸入器对每只动物进行麻醉，从 5% 异氟醚开始，然后减少到 2-3% 以维持其余程序的镇静作用。
2. 通过引起对尾巴/爪子捏诱导的伤害感受刺激没有反应来确认完全麻醉。
3. 剪剃掉背侧（头到尾）的毛发，然后涂抹脱毛霜（3 分钟）去除剩余的毛发。最后，用流水/湿磨砂膏清洗背部，然后将动物放回笼子里。
   注意：这是必要的，以避免在皮肤受伤时对皮肤造成额外刺激和化学污染
4. 第二天，在角膜上涂抹眼药膏，以防止眼睛在手术过程中干燥。然后，用 3 种 betadine 磨砂膏和 70% 乙醇的替代制剂擦洗皮肤。
5. 用手术刀，在 T8-T12 椎骨水平沿背部中线切开皮肤（~1.0-1.5 厘米）。
   注意：椎骨的水平是通过使用对应于 T13 椎骨的浮动肋骨的位置从 T13 回溯计数椎骨来确定的。
6. 清除皮下脂肪组织以进入椎旁肌肉，然后慢慢解剖它们以露出两侧的棘突和椎板。
   注意：此时请非常小心地执行此程序，以避免过多出血或对脊髓造成任何伤害。
7. 使用显微解剖钳轻轻剥开椎板，进行椎板切除术，露出脊髓（T9-T10 椎骨）。
   注意：进行椎板切除术，以便暴露出多余的脊髓，以促进损伤的产生。在对照组中，仅进行椎板切除术。

3. 进行 T9-T10 完全性脊髓损伤 （SCI）

1. 使用镊子将脊柱固定在 T8 处并抬起以夸大脊柱弯曲度。
2. 使用细剪刀，将 T9 和 T10 椎骨之间的脊髓一直切开到椎管底部，以确保完全横断。
3. 在手术显微镜下观察完整横断面后，在椎板切除术部位涂抹一块皮下脂肪，以便在手术部位闭合前为脊髓提供额外的保护。
4. 闭合伤口，用连续缝合线缝合椎旁肌肉和浅筋膜，然后用缝合夹缝合皮肤。
5. SCI 后，观察第二天的排便情况;但是，通过手动排尿来控制膀胱。
   注意：Basso 鼠标量表 （BMS） 可用于监测 SCI 后后肢功能恢复的进展情况第 2 天，然后每周监测一次。