大鼠脑组织样品的疏水组织透明化方法

摘要

来源：Kirchner， KN 等人，大鼠脑组织的疏水组织透明化方法。J. Vis. Exp. （2020 年）。

该视频演示了大鼠脑组织样品的疏水组织透明化方法。样品在甲醇中依次脱水，用二氯甲烷和甲醇混合物处理以溶解脂质和色素，然后转移到二苄醚中以完全透明化组织，无需薄切片即可实现详细成像。

方案

所有涉及动物样本的程序均已由适当的动物伦理审查委员会审查和批准。

1. 组织透明化

1. 将样品在 20% 甲醇/80% 去离子水溶液中在室温 （RT） 下孵育 1 小时。
2. 将样品在 40% 甲醇/60% 去离子水溶液中于 RT 孵育 1 小时。
3. 将样品在 60% 甲醇/40% 去离子水溶液中在 RT 下孵育 1 小时。
4. 将样品在 80% 甲醇/20% 去离子水溶液中在 RT 下孵育 1 小时。
5. 将样品在 100% 甲醇中在 RT 下孵育 1 小时。
6. 在 RT 下在新鲜的 100% 甲醇中孵育过夜。
7. 在 66% 二氯甲烷 （DCM）/33% 甲醇中孵育 3 小时，在 RT 下摇动。
8. 在二苄醚 （DBE） 中孵育，不要摇晃。将样品留在 DBE 中直至澄清，并储存在 DBE 中直至成像。

材料