一种用于大鼠脑组织样本的疏水性组织透明化方法

摘要

来源：Kirchner, K.N., 等，一种用于大鼠脑组织的疏水性组织透明化方法。J. Vis. Exp. (2020)。

本视频演示了大鼠脑组织样本的疏水性透明化方法。样本依次在甲醇中脱水，用二氯甲烷和甲醇的混合液处理以溶解脂质和色素，然后转移至二苄基醚中实现组织完全透明化，从而可在无需切片的情况下进行精细成像。

方案

所有涉及动物样本的操作均已经过适当的动物伦理审查委员会审核并批准。

1. 组织透明化

1. 将样品在20%甲醇/80%去离子水溶液中室温（RT）孵育1小时。
2. 将样品在40%甲醇/60%去离子水溶液中室温（RT）孵育1小时。
3. 将样品在60%甲醇/40%去离子水溶液中室温（RT）孵育1小时。
4. 将样品在80%甲醇/20%去离子水溶液中室温（RT）孵育1小时。
5. 将样品在100%甲醇中室温（RT）孵育1小时。
6. 在新鲜的100%甲醇中室温（RT）孵育过夜。
7. 在66%二氯甲烷（DCM）/33%甲醇中室温（RT）振荡孵育3小时。
8. 在二苄基醚（DBE）中不振荡孵育。将样品置于DBE中直至变得透明，并保存于DBE中直至成像。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
DBE	Sigma-Aldrich	108014-1KG
二氯甲烷（DCM）	Sigma-Aldrich	270997-100mL
甲醇	Sigma-Aldrich	34860-1l-R