EAE 小鼠模型中的生物发光成像

摘要

来源：Schmitz， K.， et al.，小鼠多发性硬化症EAE模型中视神经炎和脑炎症的生物发光和近红外成像。J. 相对于实验 （2017 年）。

该视频演示了使用生物发光成像可视化和监测实验性自身免疫性脑脊髓炎或 EAE 诱导的视神经炎症的方法。它包括定位鼠标、试剂注射和捕获序列图像，以监测生物发光随时间的变化。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 视神经炎和脑炎的生物发光成像

1. 成像系统的设置
   1. 使用任何允许分析生物发光和近红外信号的设备进行体内成像。
   2. 在所有成像过程中，将小鼠保持在 2 - 2.5% 异氟醚麻醉下。
   3. 使用中间的气体供应，将一只或两只小鼠并排放置在设备中。将上脊柱置于中心。
   4. 为了评估药物效果，同时使用两只小鼠比较成对的小鼠，每组一只。这对于生物发光成像非常重要。
   5. 用黑布保护免疫部位，并拍摄照片和基线图像以评估小鼠/小鼠的正确位置。对于所有图像，请在距离相机 6.5 cm 处使用 B 焦点。
2. 生物发光炎症探针的注射和成像
   1. 使用体内成像系统设置：Epi-BLI，Em 滤光片打开，Ex 滤光片块，光圈 1，像素合并 8，焦点 B = 6.5 厘米，广告曝光 120 秒;拍摄基线图像。
   2. 腹腔注射 100 μL 即用型化学发光试剂 （40 mg/mL）。在填充注射器之前充分混合。
   3. 注射后 5 、 10 和 15 分钟捕获生物发光图像。生物发光峰的时间进程因动物而异。
      注：注射后5 - 10分钟出现峰值;15 分钟时下降表示不需要更多图像。使用对照组和治疗组的小鼠对来消除由于不同时间进程引起的微小偏倚。
   4. 填写与实验相关的描述。观察自动弹出的对话框;它包括诸如小鼠品系、性别、时间点、探针注射时间、组、等信息。将文件全部保存在一个文件夹中;它们将具有 Time tags 和 All Descriptions。

材料