离体钙成像研究Drosophila脑对神经肽的反应

摘要

来源： Ishimoto, H. et. al.,利用离体钙成像技术可视化果蝇脑对内分泌信号的响应。J. Vis. Exp. (2018)

本视频演示了利用钙成像技术研究Drosophila脑神经元对神经肽的响应。表达荧光钙指示剂的神经元可揭示细胞内钙离子动态变化及其对信号分子的功能性反应。

方案

1. 幼虫脑外植体的制备

结果

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
钨棒	A-M systems, Sequim, WA, USA	717000
蓝丁胶	Bostik, Paris, France	3049100	类似腻子的可重复使用粘合剂
方形表面皿，1 5/8 英寸	Carolina Biological Supply Company, Burlington, NC, USA	742300
PBS	TAKARA Bio Inc., Kusatsu, Shiga, Japan	T900	磷酸盐缓冲盐溶液
CCHa2	SCRUM Inc., Tokyo, Japan		定制合成肽
Ghrerin	Peptide institute Inc., Osaka, Japan	4372-s
Nociceptin	Peptide institute Inc., Osaka, Japan	4313-v
Axio Imager A2	Carl Zeiss, Oberkochen, Germany	Axio Imager A2	荧光显微镜
水浸物镜 W N-Achroplan 20x/0.5 M27	Carl Zeiss, Oberkochen, Germany	420957-9900-000	水浸式物镜
P-725 PIFOC 长行程物镜扫描器	Physik Instrumente GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Germany	N/A	压电驱动镜头移动器
共聚焦扫描单元 CSU-W1	Yokogawa Electric Corporation, Tokyo, Japan	CSU-W1	转盘式共聚焦扫描头
ImagEM C9100-13	Hamamatsu Photonics, Sizuoka, Japan	C9100-13	EM-CCD 相机
OBIS 488 nm LS 60 mW	Coherent, Santa Clara, CA, USA	1178770	488 nm 激光器
488/568/647 nm Yokogawa 二向色分光镜	Semrock, Rochester, NY, USA	Di01-T405/488/568/647-13x15x0.5	二向色分光镜
528/38 nm BrightLine 单通带带通滤光片	Semrock, Rochester, NY, USA	FF01-528/38-25	发射滤光片
µManager	Open Imaging, Inc.	N/A	https://micro-manager.org