多聚谷氨酰胺蛋白聚集的荧光寿命成像在 秀丽隐杆线虫 神经元

摘要

来源： Pigazzini, M. L., 等 衰老过程中淀粉样结构的表征 秀丽隐杆线虫 使用荧光寿命成像 J. Vis. Exp. (2020).

本视频展示了如何利用荧光寿命成像显微技术（FLIM）评估秀丽隐杆线虫（C. elegans）神经元中多聚谷氨酰胺（polyQ）蛋白的聚集情况，并比较对照组与分子伴侣蛋白缺陷型线虫。分子伴侣缺陷型线虫中蛋白聚集增加，促进了聚集荧光团之间的能量转移，从而缩短荧光寿命。FLIM生成的彩色编码图谱呈现了这些差异，突显了不同实验组之间的聚集水平差异。

方案

1. FLIM 数据的采集

结果

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
氨苄青霉素	Carl Roth GmbH + Co. KG	K029.3	抗生素
B&H DCS-120 SPC-150	Becker & Hickl GmbH		FLIM 采集软件
B&H SPC830-SPC Image	Becker & Hickl GmbH		FLIM 采集软件
C. elegans nQ40-CFP			Morimoto 实验室惠赠
盖玻片-18x18mm	Carl Roth GmbH + Co. KG	657.2	盖玻片
Leica M165 FC	Leica Camera AG		安装用体视显微镜
Leica TCS SP5	Leica Camera AG		共聚焦显微镜
盐酸左旋咪唑	AppliChem GmbH	A4341	麻醉剂
PicoQuant PicoHarp300	PicoQuant GmbH		FLIM 采集软件
叠氮化钠	Carl Roth GmbH + Co. KG	K305.1	麻醉剂
标准载玻片	Carl Roth GmbH + Co. KG	656.1	玻璃载玻片
通用琼脂糖	Bio & Sell GmbH	BS20.46.500
Zeiss AxioObserver.Z1	Carl Zeiss AG		共聚焦显微镜
Zeiss LSM510-Meta NLO	Carl Zeiss AG		共聚焦显微镜