多光谱漫反射成像技术用于大鼠脑血流与组织结构研究

摘要

来源： Nishidate, I., 等同时评估脑血流动力学与脑组织光散射特性 体内 使用多光谱漫反射成像的大鼠脑部研究 视频实验杂志 (2017)

本视频展示了使用多光谱漫反射成像技术分析麻醉大鼠脑血流、氧含量及组织结构变化的方法，有助于深入了解不同条件下脑部血流动力学和形态学的特征。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 样本图像的获取
   注意：使用相同的采集条件，采集并保存暴露的大鼠脑组织在九个波长下的漫反射光强度图像至个人计算机的硬盘中。
   1. 将大鼠轻轻放置在载物台上，并缓慢调节载物台水平，使相机能够聚焦于大鼠脑表面。
   2. 从文件菜单中选择“保存”命令，将图像保存为文件。
   3. 通过旋转滤光轮来改变滤光片位置。
   4. 根据上述步骤，在其他波长下依次保存图像。文件名应标明样本和对应波长（例如 R500、R520、R540 … R760）。
2. 暗场图像的获取
   注意：CCD（电荷耦合器件）相机可响应电信号产生光强度信号。然而，即使无光线进入探测器，电路和探测器中的噪声仍会产生微弱输出，称为暗电流噪声。为了准确测量光的光谱强度，需记录暗电流成分作为暗场图像，并从实测信号中减去。暗场图像是在光路被遮挡的情况下采集的图像。
   1. 关闭卤素灯光源。
   2. 使用遮挡板阻断进入CCD相机系统的光路。
   3. 从文件菜单中选择“保存”命令，将图像保存为文件。文件名应标明样本（例如 Dark）。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
150 W 卤素灯光源	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	LA-150SAE
导光管	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	LGC1-5L1000
聚光透镜	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	SH-F16
干涉滤光片 l@500 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65088
干涉滤光片 l@520 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65093
干涉滤光片 l@540 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65096
干涉滤光片 l@560 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67766
干涉滤光片 l@570 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67767
干涉滤光片 l@580 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65646
干涉滤光片 l@600 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65102
干涉滤光片 l@730 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65115
干涉滤光片 l@760 nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67777
电动滤光轮	Andover Corporation, NH, USA	FW-MOT-12.5
16 位制冷 CCD 相机	Bitran, Japan	BS-40
视频变焦镜头	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	VZMTM300i
具有 99% 漫反射率的 Spectralon 白色标准板	Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA	SRS-99-020