前列腺类器官研究技术与方法：三维（3D）培养、离心沉降、凹面石蜡膜及融合法

TOPICAL COLLECTIONS

Guest Editors

Sanghee Lee

University of California San Diego

Sanghee Lee 博士于2015年获得威斯康星大学麦迪逊分校泌尿科与细胞及分子生物学项目博士学位。她的论文导师是 Wade Bushman 博士，研究内容包括膀胱与前列腺之间的神经交互作用，以及前列腺炎症诱导的成年小鼠膀胱功能改变。作为博士后研究员，Lee 博士在科罗拉多大学安舒茨医学校区 Anna Malykhina 博士的实验室中，研究了多发性硬化小鼠模型中的神经源性膀胱功能障碍。2017年，Lee 博士加入加州大学圣地亚哥分校（UCSD），成为首位神经泌尿学研究员，同时在 UCSD 泌尿科和圣地亚哥雷迪儿童医院任职。她的研究指导委员会成员包括 Christina Jamieson 博士（项目负责人）、George Chiang 博士、Yahir Santiago-Lastra 博士、Todd Coleman 博士和 Tony Yaksh 博士。她目前的研究兴趣包括骨转移性前列腺癌的转移机制与疼痛机制。

Christina Jamieson

University of California San Diego

Jamieson 博士是加州大学圣地亚哥分校（UCSD）泌尿外科系泌尿肿瘤学领域的转化科学家。她致力于研究骨转移的成因，并建立了基于患者样本的新模型，用于测试新型疗法，为晚期去势抵抗性前列腺癌患者带来希望。她在布兰迪斯大学师从 Ranjan Sen 博士获得分子免疫学博士学位，期间发现T细胞受体（TCR）刺激本身即可诱导NF-kB活化和NF-AT激活。Jamieson 博士随后前往加州大学旧金山分校（UCSF）开展博士后研究，先跟随 Dan R. Littman 博士，之后加入 Keith R. Yamamoto 博士的团队。她揭示了TCR与糖皮质激素之间信号串扰的机制，该机制调控T细胞前体的存活，从而塑造免疫组库。这些通路在类固醇激素驱动的癌症中也可能发生异常调控。 Jamieson 博士最初在加州大学洛杉矶分校（UCLA）泌尿外科与人类遗传学系担任助理教授，研究癌症中对类固醇激素治疗产生耐药的机制；随后她转至UCSD，专注于利用基于患者样本的模型和新疗法，克服骨转移性前列腺癌中的治疗耐药问题。

Collection Overview

类器官是三维（3D）体外细胞结构，被认为能够重现并维持细胞在体内的存活状态及其对治疗药物的反应性。Matrigel 或胶原蛋白已被用作细胞外基质，以支持患者来源的细胞形成三维结构/类器官，包括囊状结构和球状体。三维培养的类器官被认为是研究肿瘤发生机制以及评估抗癌药物作用的优秀模型。因此，已针对多种癌症（如脑癌、乳腺癌、肺癌和前列腺癌等）开发了相应的类器官培养方法。然而，前列腺癌具有一定的特殊性，目前其类器官培养方法的成功率低于其他癌症。建立前列腺类器官培养的困难可能部分源于肿瘤发生的异质性。大多数前列腺类器官来源于患者来源的异种移植瘤（PDXs），在基因组水平上能够代表患者的前列腺癌特征。因此，PDX类器官模型对于研究靶分子的下游信号通路以及抗癌药物治疗效果具有重要价值。多个研究团队已开发出针对其特定实验目标优化的改良方案。本合集的目标是：（1）提供若干种优化的患者来源前列腺癌三维类器官培养条件实例；（2）介绍适用于单细胞分析的后续方法，如RNA-FISH和流式细胞术；（3）分享针对类器官的免疫组织化学（IHC）和免疫荧光（IF）技术的详细操作要点；（4）提供用于评估药物处理对类器官影响的判别标准。