1. 皮下注射
图1。小鼠皮下注射.
2. 腹腔注射
图2。小鼠腹腔注射的标志.
3. 肌肉注射
图3。大鼠臀肌肌肉注射.
4. 使用尾静脉的静脉注射
图4。小鼠尾静脉注射.
来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学, 在
由于许多研究方案要求将某种物质注射到动物体内, 因此必须准确地确定运送的路线和物质的数量。有几条管理路线在老鼠和老鼠可利用。要使用的路线取决于要注入的物质的几个因素: 溶液的 pH 值、所需剂量所需的体积和溶液的粘度。如果某种物质管理不当, 可能会发生严重的组织损伤。此视频针对最常用的注入路线的各种约束方法和技术细节进行了查看.
1. 皮下注射
图1。小鼠皮下注射.
2. 腹腔注射
图2。小鼠腹腔注射的标志.
3. 肌肉注射
图3。大鼠臀肌肌肉注射.
4. 使用尾静脉的静脉注射
图4。小鼠尾静脉注射.
化合物给药通常是动物研究的一个组成部分,需要评估许多因素,以确保以人道的方式正确给药。两种主要的给药途径是肠内 - 通过消化道和肠外 - 消化道外。主要区别在于,如果化合物通过肠内途径给药,它会在进入血液之前经历肝脏代谢。然而,通过任何肠外途径,如静脉内或肌肉注射,该物质会跳过第一次通过肝脏,通常会导致更高的生物利用度。
在化合物给药系列的第一个视频中,我们将首先讨论影响给药途径选择的因素。然后我们将回顾最常见的肠外注射方法,包括皮下注射(缩写为 SC 或 SubQ)、腹膜内注射或 IP、肌内注射或 IM 以及静脉注射 AKA IV。
让我们首先回顾一下在执行任何类型的化合物给药程序之前应牢记的一些事项。第一步是准备要注射的溶液或混悬液,物质制备的第一个基本考虑因素是无菌。为防止将病原体引入动物体内,注射材料以及要使用的针头和注射器必须是无菌的。
第二个考虑因素是生理相容性。给药溶液,无论是肠内还是肠外给药,都必须生理缓冲至合适的 pH 值,以便化合物被适当吸收,并防止组织损伤。第三个因素是注射品的粘度,它在针的选择中起着关键作用。通常,在小鼠和大鼠的肠外给药程序中使用 20 至 30 号针头。这些针的针座通常采用颜色编码,以便于识别。
溶液应具有足够的流动性,以便通过这些针中的至少一根。如果解决方案可以通过多个,那么,一般来说,选择可行的最小规格。下一个因素是影响注射器选择的给药量。与针头类似,应选择具有正确刻度的准确剂量所需的最小注射器。针规和给药量也取决于给药途径以及所给药动物的物种、大小和年龄。请参阅下面的表 1,查看与此视频中讨论的路由相关的值。最后一个重要的考虑因素是吸收率,吸收率随每种给药途径的不同而变化很大,并且可能在选择最合适的方法时发挥作用。
现在,让我们谈谈常规采用的注射方法的特殊特征。
SC 或 SubQ 注射将材料放置在皮肤层和肌肉之间,位于通过提升皮肤创建的虚拟空间中。这允许安全注射更大的体积,但吸收速率比其他途径慢,从而提供更持久的效果。在 IP 给药期间,化合物直接注射到腹膜腔中。这是用于提供大量解决方案的另一种常用方法。虽然 IP 注射被认为是肠外给药,但吸收机制实际上更类似于口服给药。
IM 注射将化合物直接输送到臀肌或腓肠肌中。由于肌肉组织内有大量的血管,肌内注射的物质会迅速被吸收,这可能使其成为在某些情况下的首选途径。肌肉注射不当或重复会导致神经损伤,从而导致瘫痪或肌肉坏死。最后,将静脉注射到动物的尾静脉是最有效的给药途径,因为该物质直接进入循环系统。请注意,该化合物应注射到位于尾部两侧的尾外侧静脉之一。有一条血管沿着尾巴的腹侧中线延伸,不适合注射目的。
现在我们已经讨论了背景,让我们从 SC 注射开始学习程序。对于老鼠,抓住动物的尾巴,让它放在另一个安全的表面上,比如铁丝杆盖。然后,通过提起脖子上的皮肤,形成一个帐篷,手动束缚动物。接下来,将动物放在桌子上,后脚放在表面上,并将手的脚跟放在桌子上,以避免对动物造成过度的重量,从而可能影响呼吸。
注射时,拿起装有待注射溶液的注射器,并将针头平行于脊柱并远离头部,以避免刺穿颅骨的可能性。然后,将针头斜面朝上插入,以便轻轻滑入皮肤。拉回柱塞以检查针的位置是否正确。如果柱塞向后拉时有背压,则针处于正确的位置。如果空气被吸入柱塞,则需要重新定位针头。
确认针头位置正确后,以稳定的动作缓慢注射。注射后暂停并在皮肤下稍微旋转针头,以防止注射物品丢失。然后,捏住注射部位的皮肤并拔出针头。同样的方法也可用于断奶大鼠。
对于成年大鼠,首先必须使用设备约束动物,其程序在本系列的"处理和约束基础知识"视频中进行了讨论。然后,可以像在小鼠中一样进行 SC 注射。
接下来,我们将学习如何执行 IP 注入。对于小鼠,使用双手约束技术手动约束动物,"处理和约束基础知识"视频中再次描述。确保您的非惯用手在脖子上的位置足够高,以防止动物转动。通过将尾巴放在第三和第四根手指之间,或者将皮肤牢牢地固定在其余手指和拇指根部之间来稳定后躯。
接下来,定位动物以露出腹部。将动物的头部向下倾斜到 30?角度,让肠道向前下落。注射标志可以这样勾勒出来:画一条假想的线,水平延伸到身体,在臀部顶部,从侧面到侧面。然后沿着向相反方向生长的头发相交的线画内侧边界或中线。最后,想象一下外侧边界,这是男性从臀部顶部到包皮的一条线,女性沿着。这为安全的 IP 注入提供了三角形区域。
我们将讨论的下一个方法是 IM 注入。对小鼠和大鼠进行这种技术的约束需要两个人或使用约束管。在这里,我们将介绍使用约束装置的单人方法。
首先,将动物放入管子中,后腿伸出,拉动尾巴以定位动物。接下来,抓住股骨颅骨部分的侧腹皮肤,以伸展腿部并防止窒息弯曲。然后,定位约束装置以允许观察注射部位。
要识别臀部标志,请找到股骨后方的臀肌块。可以触诊骨骼,很容易感觉到大块肌肉。注意从跗关节点到尾部的中线。您经常可以看到来自侧面和内表面的头发聚集在一起的脊向相反的方向生长。通常,注射是朝着中线外侧进行的。腓肠肌是小腿肌肉,最好从后部注射到这块肌肉中。
对于臀肌,在定位的标志处,将针头插入最大深度约 5 毫米。注射过程中避免重新定位注射器,以防止肌肉损伤。接下来,抽吸以确保放置在肌肉内,而不是血管内。最后,以缓慢而稳定的方式注射材料,因为快速注射会导致组织创伤。按照与插入相同的路线以垂直方式取出针头。对于腓肠肌,将针头插入最大深度 3 毫米,并以与臀肌相同的方式进行注射。
最后,让我们学习如何在啮齿动物的尾静脉中进行静脉注射。相同的方法适用于小鼠和大鼠。
将动物放入圆柱形约束管中,并使用设置为 MEDIUM 的电加热垫加热动物的整个身体约 2-5 分钟。继续加热动物,直到血管扩张,明显变大。请记住,尾外侧尾脉位于尾巴的两侧。位于腹侧中线的动脉不适合注射目的。旋转约束装置并定位尾部,使侧尾静脉朝上并保持在张力下。不要施加过大的张力,否则血管会拉伸,血流减少。
将针头斜面直接放在血管上,尽可能远端,并轻轻按压,将针头平行于脊柱滑入尾部。以缓慢、流畅的动作注射材料,并注意当血液被注射材料推出时,血管会变白。如果针头在血管中的位置不正确,注射时会有很强的阻力,如果用力注射,材料会充满皮下空间,尾部会膨胀。立即停止,因为设计用于静脉注射的材料可能对周围组织有腐蚀性。拔出针头并尝试在尾部更颅骨处再次注射。注射成功后,拔出针头并对注射部位施加压力以确保良好的止血,然后再将动物放回笼子。
现在您已经熟悉了常见的注射方法,让我们看看这些给药途径的一些应用,而不是药物输送。
在几个实验中,给小鼠注射特定的病原体来研究感染。在这里,研究人员使用皮下途径引入导致病变的抗生素耐药细菌,这些病变的大小可以作为病原体毒力的读数。许多科学家都对研究全身递送后干细胞的分布和存活感兴趣。在这项研究中,研究人员在多发性硬化症动物模型中进行了基因标记神经干细胞的尾静脉注射,并定位了注射细胞到脊髓和大脑区域的分布。
在另一项实验中,研究人员在肌肉萎缩症的动物模型中肌肉注射荧光标记的成肌细胞。之后,进行生物发光以分析干细胞的成功植入。最后,注射也可用于生成动物模型。这些科学家在雄性 Wistar 大鼠体内腹膜内注射二甲基亚硝胺(一种强效肝脏毒素),以产生肝纤维化的动物模型,然后用于研究肝病的发展。
您刚刚观看了 JoVE 关于化合物给药的第一部分,其中讨论了常用的肠外注射。请记住,最佳输送途径基于几个因素,包括注射溶液的 pH 值、体积和粘度。每种技术都有优点和缺点,必须根据实验需要来考虑。一如既往,感谢您的观看!
物质管理是利用动物的实验协议的一个共同组成部分。在选择分娩路线时, 必须考虑许多因素, 包括那些负责给动物加药的人的技术熟练程度、动物的大小、液体的粘度以及要管理的数量。仔细考虑这些因素将会提高动物的福祉和实验的整体结果.
Chapters in this video
0:00
Overview
1:30
Key Considerations for Compound Administration
3:43
Characteristics of Different Injection Techniques
5:15
Subcutaneous Injection
7:15
Intraperitoneal (IP) Injection
9:30
Intramuscular (IM) Injection
12:02
Intravenous (IV) Injection via the Tail Vein
13:36
Applications
14:34
Summary
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