Question 1

在紫外-可见光谱分析中，当光通过样品时会发生什么？

Accepted Answer

当光通过样品时，一些波长被分子吸收，而其他波长被传输。传输是传输光强度与入射光强度的比值。吸光度，计算为A = -log(T)，指示样品吸收了多少光。这种吸光度测量是识别化合物和量化其浓度的基础。

Question 2

Beer's定律如何将吸光度与样品浓度联系起来？

Accepted Answer

比尔-朗伯定律指出，吸光度等于摩尔衰减系数乘以路径长度和浓度。摩尔衰减系数反映了化合物在特定波长下吸收光的能力。标准比色皿的路径长度为1厘米。如果已知吸光度，可以使用这种关系来计算样品浓度，或者可以使用 校准曲线原理和应用 来确定未知浓度。

Question 3

为什么每个分子都有一个独特的吸收光谱？

Accepted Answer

每个分子的独特吸收光谱源自其独特的化学结构，这决定了带隙——基态和激发态之间的能量差。当一个光子的能量恰好与此带隙匹配时，分子吸收它并转变为更高能量状态。不同的分子结构具有不同的带隙，在特定波长下产生特征性的吸收模式。

Question 4

在紫外-可见分光光度计中，哪些设备组件选择特定波长？

Accepted Answer

单色仪按空间分离光的波长，并在所需波长出现的位置定位一个出射狭缝。另外，滤光器可以选择特定的波长。大多数分光光度计使用氘灯用于紫外线范围（170–375 nm），并使用钨丝灯用于可见光范围（350–2,500 nm）。单色仪可以扫描波长范围以生成完整的吸光度谱。

Question 5

你如何为UV-Vis测量准备样品和空白？

Accepted Answer

首先，通过在干净的比色皿中加入样品溶剂并用无纤维纸擦拭外侧来准备一个空白。将其插入分光光度计中，确保带槽的一侧不在光束路径上，并固定盖子。测量并记录空白的吸光度。然后用样品冲洗比色皿两次，填充约四分之三，擦拭干净，并在相同的波长下测量样品的吸光度。从样品中减去空白测量值。

Question 6

紫外-可见光谱如何测量反应动力学？

Accepted Answer

通过在反应最大吸收度上随时间反复测量UV-Vis吸光度来测量反应动力学。在反应开始之前记录初始吸光度读数。加入试剂并混合后，定期测量吸光度。随着反应进行，吸光度的变化反映了化合物浓度的变化，从而允许你跟踪反应进度并确定何时完成。

Question 7

UV-Vis 光谱的常见实验室应用有哪些？

Accepted Answer

UV-Vis光谱法通过595 nm时考马斯亮蓝染料的Bradford测定法定量蛋白质，或直接在280 nm时测定蛋白质吸光度。它通过在600 nm时的光密度测量细菌细胞密度，其中OD600为1表示每毫升约有8 × 10⁸个细胞。它还通过测量有色偶氮染料络合物来定量环境污染物如氮氧化物。这些应用展示了UV-Vis在生物、环境和分析领域的多功能性。

紫外-可见（UV-Vis）光谱法 - 评估测验