毛细管电泳（CE）

1. 毛细管电泳仪器设置

1. 开启毛细管电泳（CE）仪器及计算机。通过计算机软件启动用于紫外分析的光源，使其预热。某些软件会显示指示灯，提示灯源已准备就绪（灯泡图标变为特定颜色）。
2. 创建方法文件。设置运行毛细管电泳的重要参数。本分析中，卡盒和样品储存的温度均为 35 °C。紫外检测波长 为 214 nm。
3. 编写时间程序。该程序通常包括冲洗步骤（在分析前清洗毛细管）、进样步骤，然后是电泳步骤。冲洗步骤中，使用 20 psi 压力冲洗 2 次，每次 1 分钟。第一次使用 NaOH 冲洗，以确保毛细管壁上的硅醇基团去质子化；第二次使用运行缓冲液（此处为 0.025 M 硼酸缓冲液）冲洗，以确保毛细管内充分平衡于缓冲液环境。
4. 进样步骤采用压力进样，压力为 0.5 psi，持续 5 秒。
5. 电泳步骤的条件为：分离电压 20 kV，时间 5 分钟，正极性模式。对于每个步骤，还需指明哪个样品瓶为进样端（入口），哪个为出样端（出口）。在输入所有参数后，保存方法文件。

2. 标准品和苏打样品的制备

1. 用水配制阿斯巴甜、咖啡因和苯甲酸的500 ppm储备液。每种溶液各配制50 mL，使用容量瓶定容。
2. 在10 mL容量瓶中配制含有150 ppm阿斯巴甜、150 ppm咖啡因和100 ppm苯甲酸的标准溶液。
3. 在10 mL容量瓶中分别配制50 ppm、100 ppm、150 ppm和200 ppm的系列咖啡因标准溶液。

3. 在毛细管电泳仪上运行样品

1. 将装有标准品或汽水样品的样品瓶放入样品瓶架中。务必记录每个样品所在的插槽位置。其中两个插槽分别装有硼酸运行缓冲液和 0.1 M NaOH 清洗液。
2. 在方法文件中输入第一个样品瓶所在的插槽编号。
3. 执行一次运行，确保输入程序所要求的全部数据信息。
4. 继续采集数据，为每个样品更换相应的进样瓶。依次运行混合标准品、三种浓度的咖啡因标准品，以及百事可乐和健怡百事可乐样品。
5. 将目标样品插入仪器，并选择相应的仪器设置。
6. 在计算机上分析数据。计算各峰的峰面积，并将标准品与实际样品的谱图叠加，以辅助峰的鉴定。针对咖啡因数据绘制标准曲线。