药物注射 II

许多实验要求通过口服或局部途径将化合物施用到动物体内，以便该方法更好地模拟实验物质的自然摄入。

对于口服给药，该化合物可以溶解到饮用水中或掺入动物食用的食物中。另一种更精确的口服给药方法是口服强饲法，其中使用大针头将化合物直接放入胃中。另一方面，外用药物可以直接放置在皮肤表面，通常只影响其涂抹的区域。这些策略中的每一种都有优点和局限性，我们将在本视频中讨论。之后，我们将演示如何在实验室动物中执行这些化合物给药技术，以及它们的一些应用。

在深入研究协议之前，让我们回顾一下这些技术的注意事项、优点和缺点。片剂、胶囊或液体口服是人类最常用的给药方法。然而，片剂和胶囊对啮齿动物来说是不切实际的，因此常见的口服剂量是通过将化合物溶解在饮用水或食物中来实现的。

通过饮用水给药时，通常会将蔗糖添加到水中以增强适口性。但是，它应该保持精细平衡，以鼓励正常的水摄入量，而不是因为含糖的味道而过度饮用。一个好的规则是从 10% 的蔗糖溶液开始，然后根据摄入量进行调整。另一种口服动物的方法是通过专门的食物。市售饲料中含有通常剂量的化合物，例如芬苯达唑。啮齿动物饲料公司还可以创建专门的测试日粮以满足实验要求。

这种口服形式的优点是它是无创的，连续施用化合物，并模仿人类口服药物给药。然而，它缺乏精确性，因为化合物的摄入量取决于食物或水的接受度、化合物的稳定性以及笼子里存在的动物数量。如果精确剂量对实验不重要，这种非侵入性方法最适合动物的健康。

为了更精确地口服给药，可以使用口服管饲法，在特定时间和指定体积将化合物直接沉积到胃中。但是，执行此技术需要适当的培训，因为如果动物没有得到适当的约束，可能会对动物造成严重伤害。

谈到外用药物，这些包括乳膏、乳液、软膏、喷雾剂和凝胶。通常，局部药物仅影响其应用区域。然而，它们也可能被吸收到血液中，这可能是有意或无意的。这种吸收取决于：皮肤状况、使用的表面积、物质的浓度、接触的持续时间以及试剂的脂溶性。

现在我们已经讨论了口服和局部给药方法的背景，让我们学习从通过饲料或水口服给药开始的方案。

对于剂量计算，首先您需要知道要给药的预期剂量。其次，你必须确定体重。除非另有说明，否则您可以使用小鼠或大鼠品系的平均重量进行计算，而不是称量单个动物。第三，您应该了解每个笼子的动物数量，第四，您需要了解每个笼子的平均每日水或食物消耗量。

请记住，由于化合物的不稳定性，配方食品或含有溶解化合物的饮用水可能需要比标准食品或水更频繁地更换。一些化合物可能对光敏感或可能随着时间的推移而沉淀。

现在，让我们学习如何通过在小鼠和大鼠中进行口服强饲来口服精确剂量。

第一步是为手术选择合适的针头。这些要么由不锈钢制成，要么是一次性的，带有灵活的塑料轴和硅胶尖端。对于小鼠，20-25 号长为 1.5 英寸的直或弯曲剂量针是合适的。对于大鼠，选择 18-20 号长的 2-3 号直或弯曲的给药针。正确的针规和注射器选择还取决于体积和粘度。观看化合物给药 I 视频，了解这些因素的影响。对于浓稠液体的计量，首选 Luer lock 注射器。

做出选择后，将注射器固定在针头上，这样无需转动针头即可读取针筒上的刻度。这很重要，因为一旦将针头放入食管，任何旋转都可能破坏食管壁，从而导致动物死亡。接下来，用正确体积的待给药溶液填充注射器。

应始终对吞咽反射完整的清醒动物进行此方法，以防止意外放入气管。使用适当的约束技术对于此程序至关重要。对于鼠标，抓住头部底部的皮肤并紧紧握住 scruff。这确保了头部左右移动的机会最小。此外，请确保身体从头部到尾巴悬挂在一条直线上;任何扭曲都会阻碍管饲针进入食道。后躯也必须稳定以防止身体旋转。

要约束老鼠，请用食指和中指在脖子两侧抓住它的肩膀。这将防止老鼠左右转动头部。拇指、第三和第四根手指环绕胸部，以防止动物向前或向后移动。

正确约束动物后，将针头的曲线朝下并与颈部的自然曲线保持一致。然后，将针头从右侧或左侧穿过耳道，以朝咽后部倾斜的角度插入门牙和磨牙之间。现在针头已放入口腔，用它使头部向后倾斜，直到鼻子向上。此时，针头应该很容易滑入食道。将针头定位在胃中后，轻轻地沉积化合物。然后，从动物身上取下针头，确保不要旋转它。重要的是不要强行向下针头。如果您感到任何阻力，请将其移除并重试。在执行该程序时，如果动物出现紫绀或呼吸窘迫的迹象，或者如果嘴里有溶液流出，应立即取出给药针头，并将动物释放到笼子中。

最后，让我们回顾一下实验室动物局部给药的程序。首先麻醉动物。这通常使用速效吸入剂来完成，这样可以快速恢复动物。有关麻醉管理的更多详细信息，请参阅此集合中的另一个视频。

接下来，使用理发器从应用区域去除所有毛发。为避免任何割伤，请将理发器的平坦表面贴在皮肤上，并沿与毛发生长相反的方向剃须。然后，用水清洁皮肤并用纱布垫擦干。现在，使用棉签涂抹器，将物质直接涂抹在皮肤上。为获得最佳效果，请涂抹几层薄薄的软膏或乳膏，而不是一次性涂抹厚层。为防止因梳理而意外摄入局部涂抹的化合物，请放置一个小项圈或防护罩，以防止动物接触到受影响的身体部位。此外，为防止笼中配偶的同种异体修饰，应单独饲养动物。

现在您已经了解了这些替代给药途径，让我们看看它们今天是如何用于生物医学研究的。

口服强饲法的重要应用之一是精确施用物质以研究它们对胃肠道的直接影响。在这里，研究人员使用这种方法将转化的益生菌酵母直接输送到动物的胃中。然后他们解剖了 Peyer 斑块，这些斑块是来自小肠的有组织的淋巴结节，以研究输送的微生物的粘附性。

非侵入性口服途径可用于模拟食源性感染的自然方式。在这项实验中，科学家开发了一种通过摄入受污染的食物在小鼠中经口传播单核细胞增生李斯特菌的模型。感染后，研究人员采集了小肠、结肠、脾脏、肝脏和胆囊等各种器官，以分析感染向这些组织的传播情况。

最后，一些研究人员对研究紫外线辐射可能导致晒伤的机制感兴趣。在这里，科学家们使用局部途径涂抹一种药理物质，诱导表皮黑色素（一种紫外线防护剂）的产生。之后，他们使用类似于人体研究的方案来检查局部应用药物对紫外线辐射诱导的红斑的保护作用。

您刚刚观看了 JoVE 的第二部分关于口服和局部给药的化合物给药方法。您现在应该了解如何使用饲料或水对动物进行口服给药，以及如何进行更精确的口服管饲法给药。最后，您应该了解局部给药的注意事项和方法，以及这些不同技术的应用。一如既往，感谢您的观看！