Question 1

什么是血细胞计数板，为什么用于细胞计数？

Accepted Answer

血细胞计数板是一个带有激光蚀刻网格的计数室，最初设计用于计数血细胞。它包含两个计数室，网格被分成不同大小的象限。该工具允许研究人员在光学显微镜下计数细胞并计算总细胞浓度，对于需要已知细胞数量的生物医学实验来说至关重要。

Question 2

血细胞计数板的网格结构如何用于细胞计数？

Accepted Answer

血球计数板网格由9个主要象限组成。四个角落的象限又被分为16个较小的象限，而中心象限包含25个较小的象限，每个较小的象限又被进一步分为16个微小象限。每个大方格的面积为1 mm²，包含的体积为0.1 mm³，或1/10,000的毫升，这对于计算总细胞浓度至关重要。

Question 3

在将细胞加载到血细胞计数板之前，需要哪些准备步骤？

Accepted Answer

用乙醇和纸巾清洁载玻片和计数池，以去除绒毛、指纹和浮水印。在载玻片安装支架上涂抹水，利用表面张力固定载玻片。轻轻地通过上下移动移液器来涡旋细胞悬液以分离细胞团，然后吸取约10微升并将其加载到引入端口，毛细管作用将溶液拉过网格。

Question 4

您如何根据细胞密度选择要计算的象限？

Accepted Answer

根据细胞密度选择象限大小：对于低细胞数，统计一个角落象限的所有细胞；对于中等密度，使用16个较小象限之一；对于高密度，统计25个中心象限之一的细胞。始终每个象限统计至少20-50个细胞以确保准确性。统计接触顶部和左侧线但忽略接触底部或右侧线的细胞。

Question 5

你如何计算样本中的总细胞数？

Accepted Answer

将细胞数量乘以10,000（因为每个大方格等于1/10,000毫升）。根据象限大小应用乘数：大象限乘以1，角落象限乘以16，中央象限乘以25。如果你稀释了样品，请乘以稀释倍数。最后，乘以总样品体积以确定实验样品中的总细胞数。

Question 6

什么是台甫蓝染色排除法，它如何决定细胞活力？

Accepted Answer

特拉青是一种活体染料，可以区分活细胞和死细胞。活细胞具有完整的膜，并排除染料，在相差显微镜下显得明亮金黄。死细胞缺乏膜的完整性，使特拉青能够进入并染色细胞质呈蓝色。只计数活细胞，并将最终计数乘以特拉青稀释倍数，以确定样品中的活细胞浓度。

Question 7

为什么在生物医学实验中准确的细胞计数很重要？

Accepted Answer

准确的细胞计数确保了细胞基测定中具有可重复性、具有统计相关性的数据。研究人员在从组织中分离细胞、在共培养实验中混合不同的细胞群体、执行ELISPOT等免疫测定或从细胞中提取mRNA时需要精确的细胞数量。了解确切的细胞数量允许适当的稀释和跨重复实验的实验条件标准化并支持细胞传代 lines培养方法和应用。

使用细胞计数板计数细胞 - 评估测验