Question 1

永生化细胞系和干细胞系之间有什么区别？

Accepted Answer

永生化细胞系来源于具有影响细胞周期调节的突变的多细胞生物，允许无限增殖。干细胞系是通过从成体或胚胎组织中分离出自我更新、多能的细胞产生的。在适当的条件下，两者都可以在培养中无限期地维持，但干细胞保留多能性，而永生化细胞则不具备。

Question 2

为什么定期更换细胞培养基很重要？

Accepted Answer

随着时间的推移，有毒代谢物在细胞培养基中积累，降低pH值并减少营养物质的可用性。新鲜培养基能维持细胞健康并支持持续扩展。培养基颜色指示剂（如苯酚红）会在需要更换时发出信号——橙色表示新鲜培养基，黄色表示需要立即更换的酸性条件，粉色则表示pH值过碱。

Question 3

90% 融合度是什么意思？为什么它对细胞传代很重要？

Accepted Answer

融合度指的是细胞覆盖的培养容器表面的百分比。在90%的融合度时，黏附细胞覆盖了大部分容器底部，必须传代以防止过度生长并维持细胞健康。监控融合度确保在最佳时间分裂细胞以扩展并防止有毒代谢物的积累。

Question 4

完整细胞培养基的基本组成部分是什么？

Accepted Answer

完全培养基需要血清，如热处理的胎牛血清以提供生长因子，抗生素如青霉素和链霉素以防止污染，以及额外的生长因子如成纤维细胞生长因子以延长扩展。每种细胞系都需要根据其需求定制特定的生长补充鸡尾酒。未使用时将完全培养基存储在4°C。

Question 5

胰蛋白酶如何用于从培养板上去除粘附的细胞？

Accepted Answer

胰蛋白酶是一种消化酶，可分解使细胞粘附于塑料表面的蛋白质。首先用不含钙和镁的磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞，然后加入胰蛋白酶并在37°C下孵育约5分钟。精确的时间控制对于避免损伤细胞表面蛋白质至关重要。在将细胞转移到锥形管中计数之前，加入新鲜培养基以停止蛋白水解 使用血细胞计数板方法和应用。

Question 6

有哪些替代方法可以移除对标准胰蛋白酶处理过于粘附的细胞？

Accepted Answer

对于对酶解敏感或极易粘附在培养板上的细胞，可以使用细胞刮刀轻轻地从培养容器底部刮取细胞。或者，可以使用血清移液器在用培养基冲洗的同时进行坚定的刮取动作。机械分离需要小心，因为这些方法可能会损伤娇嫩的细胞。

Question 7

如何比单层烧瓶更快地扩展细胞培养？

Accepted Answer

多层烧瓶将细胞培养扩展3-5倍，相比单层烧瓶而言，从而能够更快且更可重复地扩大细胞扩展。这些专门的培养容器为细胞生长提供了更大的表面积，使其成为高效产生大量细胞的理想选择，同时保持适当的培养条件。

基本的组织培养:细胞传代 - 评估测验