Question 1

在实验室中培养秀丽隐杆线虫的最佳温度条件是什么？

Accepted Answer

C. elegans 可以在 16、20 或 25 °C 下培养，具体取决于实验要求。温度直接影响生命周期速度：在 25 °C 下，蠕虫完成生命周期的速度比在 16 °C 下快 2.1 倍。更快的生长意味着蠕虫更快成熟、产下更多卵，并消耗更多食物，使得温度选择对实验设计至关重要。

Question 2

秀丽隐杆线虫吃什么？它们在实验室中是如何喂养的？

Accepted Answer

C. elegans 被喂食 OP50，这是一种在全球所有蠕虫实验室中使用的标准化大肠杆菌菌株。在野外，蠕虫以腐烂的植物物质为食，但在实验室中它们食用在线虫生长培养基（NGM）平板或液体培养基上培养的 OP50。这种标准化的饮食确保了跨研究机构的实验条件一致。

Question 3

你如何制作和准备用于秀丽隐杆线虫培养的NGM板？

Accepted Answer

将线虫生长培养基成分与去离子水混合，高压灭菌至少15分钟，然后冷却至55 °C。如果需要，加入无菌添加剂，用移液器将培养基移入培养皿直至3/2满，然后过夜干燥。用重悬至10X浓度的OP50大肠杆菌接种，过夜干燥，然后在使用前暴露于紫外线下进行灭菌。

Question 4

什么是蜗杆选取器以及它是如何构造的？

Accepted Answer

蠕虫镊子是一种由30号铂铱线制成的工具，被封装在巴氏移液管尖端。线材在末端被压扁并向上弯曲以形成一个镊子勺，然后打磨光滑。使用这种镊子，研究人员可以在解剖显微镜下单独操作和转移蠕虫，而不会损坏它们或琼脂表面。

Question 5

秀丽隐杆线虫如何冷冻和恢复以进行长期储存？

Accepted Answer

用 M9 缓冲液洗涤新饿的幼虫，转移到冷冻管中，加入等体积的 M9 缓冲液中的 30% 甘油，并在 -80 °C 下储存。要恢复，在室温下解冻，用 OP50 吸取到新的 NGM 平板上，并在 20 °C 下孵育。2-3 天后，将动物转移到新的平板上，并允许一代繁殖后再评分表型。

Question 6

当秀丽隐杆线虫经历压力或过度拥挤时会发生什么？

Accepted Answer

当饥饿或过度拥挤时，秀丽隐杆线虫会进入dauer期，这是一个抗压的幼虫期，在这个阶段蠕虫不会衰老。这种生存机制使种群能够在不利条件下持续存活，直到资源再次可用，使dauer幼虫适合长期存储和实验操作。

Question 7

RNA 干扰如何用于研究秀丽隐杆线虫的基因功能？

Accepted Answer

研究人员准备含有表达目标基因dsRNA的大肠杆菌的培养板，蠕虫会食用这些细菌。将第四阶段幼虫期的蠕虫转移到RNAi培养板上产卵，然后在所需的发育阶段收集子代并评分表型。这种方法能够使特定基因沉默以确定其功能，利用线虫的开发和复制的见解进行疾病研究。

秀丽隐杆线虫的实验室基本培养 - 评估测验