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Methodenartikel

Ein reproduzierbares Knorpelimpaktmodell zur Erzeugung einer posttraumatischen Arthrose beim Kaninchen

2.5K Aufrufe

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DOI:

10.3791/64450

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21. November 2023

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* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das offene mediale femorale Kondylus-Impaktmodell bei Kaninchen ist zuverlässig für die Untersuchung der posttraumatischen Osteoarthritis (PTOA) und neuer therapeutischer Strategien zur Eindämmung der PTOA-Progression. Dieses Protokoll erzeugt einen isolierten Knorpeldefekt des hinteren medialen Femurkondylus bei Kaninchen unter Verwendung eines schlittenbasierten Fallturms mit einem Impaktorkopf.

Zusammenfassung

Posttraumatische Osteoarthritis (PTOA) ist für 12 % aller Arthrosefälle in den Vereinigten Staaten verantwortlich. Die PTOA kann durch ein einzelnes traumatisches Ereignis ausgelöst werden, z. B. durch eine starke Belastung des Gelenkknorpels, oder durch eine Gelenkinstabilität, wie sie bei einer Ruptur des vorderen Kreuzbandes auftritt. Derzeit gibt es keine wirksamen Therapeutika zur Vorbeugung von PTOA. Die Entwicklung eines zuverlässigen Tiermodells für PTOA ist notwendig, um die Mechanismen, durch die Knorpelschäden ablaufen, besser zu verstehen und neue Behandlungsstrategien zu untersuchen, um das Fortschreiten der PTOA zu lindern oder zu verhindern. Dieses Protokoll beschreibt ein offenes, auf einem Fallturm basierendes Stoßmodell für den Femurkondylus von Kaninchen, um Knorpelschäden zu induzieren. Dieses Modell lieferte Spitzenlasten von 579,1 ± 71,1 N und Spitzenspannungen von 81,9 ± 10,1 MPa bei einer Time-to-Peak-Last von 2,4 ± 0,5 ms. Gelenkknorpel von impaktierten medialen Femurkondylen (MFCs) wiesen höhere Raten an apoptotischen Zellen (p = 0,0058) auf und besaßen höhere Osteoarthritis Research Society International (OARSI)-Werte von 3,38 ± 1,43 im Vergleich zu den nicht impaktierten kontralateralen MFCs (0,56 ± 0,42) und anderen Knorpeloberflächen des retinierten Knies (p < 0,0001). Es wurden keine Unterschiede in den OARSI-Scores zwischen den nicht impaktierten Gelenkflächen festgestellt (p > 0,05).

Einleitung

Posttraumatische Osteoarthritis (PTOA) ist weltweit eine der Hauptursachen für Behinderungen und macht 12 % bis 16 % der symptomatischen Osteoarthritis (OA) aus1. Der derzeitige Goldstandard für die Behandlung von Arthrose im Endstadium ist die totale Knie- und Hüftendoprothetik2 oder die Arthrodese, wie im Fall der tibiotalaren oder subtalaren Arthritis im Endstadium. Obwohl die Endoprothetik weitgehend erfolgreich ist, kann sie kostspielige und krankhafte Komplikationen mit sich bringen3. Darüber hinaus ist eine Endoprothetik bei Patienten unter 50 Jahren weniger wünschenswert, da die Überlebens....

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Protokoll

Das folgende Verfahren wurde mit Genehmigung des Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der Indiana University School of Medicine durchgeführt. Alle Überlebensoperationen wurden unter sterilen Bedingungen durchgeführt, wie in den NIH-Richtlinien beschrieben. Schmerz- und Infektionsrisiken wurden mit geeigneten Analgetika und Antibiotika behandelt, um die erfolgreichen Ergebnisse zu optimieren. Für die vorliegende Studie wurden skelettreife männliche neuseeländische Weißkaninchen mit einem Gewicht von 3,0-4,0 kg verwendet.

1. Herstellung von Falltürmen

  1. Generieren Sie CAD-Zeichnungen für Komponenten des....

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Ergebnisse

Der Erfolg dieses Eingriffs wurde unmittelbar nach dem Aufprall durch die Visualisierung des Kondylus durch den Chirurgen (Abbildung 4A) und durch Röntgenaufnahmen überwacht, um sicherzustellen, dass keine Fraktur auftrat (Abbildung 4B). Es besteht die Gefahr eines Stoßversagens, das zu einer intraoperativen Fraktur des Kondylus führt. Dies war in der Regel auf eine unsachgemäße Platzierung der Steinman-Stifte zurückzuführen (Abbildung 5

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Diskussion

Dieses chirurgische Verfahren zielt darauf ab, in einem Modell der PTOA eine konsistente Knorpelschädigung an der gewichtstragenden Oberfläche des medialen Femurkondylus des Kaninchens zu erzeugen. Ein Vorteil dieses Verfahrens besteht darin, dass der posteriore Zugang zum Knie eine direkte Visualisierung des kompletten posterioren medialen Femurkondylus ermöglicht und in ca. 37 min durchgeführt werden kann (Tabelle 2). Es sollte auch beachtet werden, dass es sich um ein offenes Verletzungsmodell handelt.......

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Offenlegungen

Roman Natoli hält Vorträge für AO Trauma North America, ist Redakteur für Current Osteoporosis Reports und erhielt Tantiemen für Lehrbücher von Morgan und Claypool. Todd McKinley erhält Tantiemen von Innomed. Die übrigen Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

Diese Studie wurde unterstützt durch das DoD Peer Reviewed Medical Research Program - Investigator-Initiated Research Award W81XWH-20-1-0304 von der U.S. ARMY MEDICAL RESEARCH ACQUISITION ACTIVITY, durch NIH NIAMS R01AR076477 und ein umfassendes Musculoskeletal T32 Training Program der NIH (AR065971) und durch NIH NIAMS Grant R01 AR069657. Die Autoren danken Kevin Carr für die Bereitstellung seines Fachwissens in der Bearbeitung und Herstellung für dieses Projekt sowie Drew Brown und dem Indiana Center for Musculoskeletal Health Bone Histology Core für die Unterstützung bei der Histologie.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
FlachkopfschraubeMcMaster-Carr92210A194Edelstahl-Sechskantschraube mit Schlitzkopf, 8-32, 1/2"
#15 SkalpellklingenMcKesson1029066Skalpell McKesson Nr. 15 Edelstahl / Kunststoff Classic Grip Griff steril Einweg
1/2"-20 GewindestangeMcMaster-Carr99065A1201/2"-20 Gewindestange
10 mL SpritzeMcKesson1031801Für die Bewässerung; Allzweckspritze McKesson 10 mL Blister Pack Luer-Lock-Spitze ohne Sicherheit
3 mL SpritzeMcKesson1031804Für die Lidocain/Bupiviacain-Injektion; Allzweckspritze McKesson 3 mL Blister mit Luer-Lock-Spitze ohne Sicherheit.
3-0 PolysorbEthiconJ332H3-0 Vircryl, CT-2, 1/2 Kreis, 26 mm, konisch
4-0 MonosorbEthiconZ397H4-0 PDS 2, FS-2, 3/8 Kreis, 19mm, Schneide
5-0 PolysorbMed Vet InternationalNC9335902Med Vet International 5-0 ETHICON COATED VICRYL C-3
BeschleunigungssensorKistler8743A5Beschleunigungssensor
Adson-Browns PinzetteWorld Präzisionswerkzeuge500177Adson-Brown Pinzette, 12 cm, gerade, TC Backen, 7 x 7 Zähne
AlfaxaloneJurox49480-002-01Alfaxan Multidose von Jurox : 10 mg/mL
BuprenorphinPar Pharmaceuticals42023-0179-05Buprenorphin HCL Injektion: 0,3 mg/ml
Butorphanol Zoetis54771-2033Butorphanol-Tartrat 10mg/ml von Zoetis
Chlorhexidin HandpeelingBD371073BD E-Z Scrub 107 Chirurgische Scheuerbürste/Schwamm, 4% CHG, rote
SpannzangeSTRYKER14023Stryker 4100-62 Draht Spannzange 0,28-0,71''
Akku-TreiberhandstückSTRYKEROR-S4300Stryker 4300 CD3 Akku-Treiber 3 Handstück
Grillen-RetraktorenNovosurgicalG3510 212x Heiss (Holzheimer) Cross Action Retractor
Dissector SchereJorvet LabsJ0662Aesculap AG, Metzenbaum, Schere, gerade 5 3/4″
Elizabethian CollarElizaSoft62054ElizaSoft Elizabethan Recovery Collar
EnrofloxacinCustom MedsEnrofloxacin compoundiert durch Custom Meds
AugensalbePivetal 46066-753-55Pivetal Articifical Tears - kürzlich zurückgerufen
Face-Mount SchachtmanschetteMcMaster-Carr5631T11Face-Mount Schachtmanschette
Fast grünMillipore SigmaF7258Fast green
FreerJorvet LabsJ0226QFreer Aufzug
Kopfschraube -1McMaster-Carr91251A197Innensechskantschraube aus schwarzem Legierungsstahl, 8-32, 3/4"
Innensechskantschraube -2McMaster-Carr92196A194Edelstahl-Innensechskantschraube, 8-32, 1/2"
-Innensechskantschraube -3McMaster-Carr92196A146Edelstahl-Innensechskantschraube, 8-32, 1/2"
-Innensechskantschraube -4McMaster-Carr92196A151Edelstahl-Innensechskantschraube, 6-32, 3/4"
Hämatoxylinlösung, Kieme Nr. 1Millipore SigmaGHS132-1LHämatoxylinlösung, Kiemenkorn Nr. 1
SechskantmutterMcMaster-Carr91841A007Sechskantmutter aus Edelstahl, 6-32
Halte-SchnellspannerMcMaster-Carr5126A71Halte-Schnellspanner
Schlaggerätn/an/aSonderanfertigung
Schlagplattformn/an/aSonderanfertigung
K-DrähteJorvet LabsJ0250AJorVet Intramedulläre Steinman Pins, Trokar-Trokar 1/16" x 7"
Lab ViewNational Instrumentsn/an/a
WägezelleKistler9712B5000Wägezelle
MATLABThe MathWorks Inc.n/an/a
MikroskopLeicaDMi-8Leica DMi8 Mikroskop mit LAS-X Software
MidazolamAlmaject72611-749-10Midazolam Hydrochlorid Injektion: 5mg/ml durch Almaject
Fräsmaschine TiefenanschlägeMcMaster-Carr2949A71Clamp-On Fräsmaschine Tiefenanschläge
Mobiler C-BogenPhilips718095BV  Pulsera, Mobiler C-Bogen
Montiertes LinearkugellagerMcMaster-Carr9338T7Montiertes Linearkugellager
Nadeltreiber A2Z ScilabA2ZTCIN39TC Webster Nadelhalter Glatte Backen 5", Premium
PentobarbitalVortech0298-9373-68Pentobarbital 390 mg/mL von Vortech
Safranin OMillipore SigmaHT90432Safranin O
Kleiner AkkuSTRYKERNS0140366212 Kleiner Akku - 9,6 V
Stahlstab, 2'McMaster-Carr89535K25Stahlstab, 2'
Sterile KochsalzlösungICU Medical6139-22AquaLite Solution Pour Bottles, 250 mL
Stryker 6110-120 System 6 BatterieladegerätSTRYKEROR-S6110-120
OP-HandschuheMcKesson1044729OP-Handschuh McKesson Perry Größe 6,5 Steriles Paar Latex Verlängerte Manschettenlänge Glatt Braun Nicht Chemo-zugelassen
OP-KittelMcKesson1104452Unverstärkter OP-Kittel mit Handtuch McKesson Große Blau Sterile AAMI Level 3
Einweg-NahtschereJorvet LabsJ0910SASuper Cut Schere, Mayo, Gerade, 5 1/2″
TUNEL FärbekitABP BioscienceA049TUNEL Chromogenes Apoptose-Detektionskit
Weitlaner RetraktorenFine Science Tools17012-112x Weitlaner-Locktite Retraktoren

Referenzen

  1. Thomas, A. C., Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Palmieri-Smith, R. M. Epidemiology of posttraumatic osteoarthritis. Journal of Athletic Training. 52 (6), 491-496 (2017).
  2. Pasquale, M. K., et al. Healthcare Utilization and costs of knee or....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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