Name: Non invasiva di imaging ottico del sistema vascolare linfatico di un mouse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: Impara a eseguire l'imaging non invasivo del sistema linfatico nei piccoli animali utilizzando la fluorescenza nel vicino infrarosso. Questo metodo consente di visualizzare i vasi linfatici e studiare il loro ruolo in processi biologici e patologie.

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Questo lavoro è stato supportato da i seguenti aiuti a Eva Sevick: NIH R01 CA128919 e NIH R01 HL092923.

Tutti gli studi sugli animali sono stati eseguiti in conformità con le norme della University of Texas Health Science Center (Houston, TX), Dipartimento di Medicina comparativa, e Centro di Imaging Molecolare dopo l&#39;esame e l&#39;approvazione del protocollo da parte loro rispettivi Cura degli animali e uso Comitato Istituzionale (IACUC) o il benessere degli animali Committee (AWC). 1. Preparazione del 24 Hr Animali Prima di Imaging La procedura che segue deve essere fatto (se necessario) il giorno prima di imaging linfatico avviene. <ol><li> Inserire animale in una scatola di induzione e sedare con isoflurano. </li><li> Una volta che l&#39;animale è in uno stato di anestesia profonda (monitorato con toe-pinch manovra), animale sedato posto su un pannolino / fluff pad naso e la posizione in un cono collegato gas isoflurano. </li><li> Agganciare tutti i capelli / pelliccia (se del caso) intorno alla zona da acquisire. </li><li> Applicare un agente depilatoria (NAIR) per l&#39;area ritagliata e lasciare on la pelle fino a 3 min. </li><li> Pulire delicatamente fuori tutte agente depilatoria con il caldo, garza umida o un tovagliolo di carta. </li><li> Lavare delicatamente la pelle con acqua tiepida e asciugare delicatamente la zona con una garza o un tovagliolo di carta. </li><li> Consentire agli animali di recuperare su una piastra elettrica o sotto una lampada di calore, e tornare alla loro gabbia. </li></ol> 2. Giorno di Imaging <ol><li> Agente di imaging Ricostituire con acqua sterile, quindi diluire con sterile, normale (0,85%) soluzione fisiologica per ottenere 645 pM (5 μg/10 pl) per ICG o 200 mM (6.8 μg/10 pl) per &#39;Abd-IRDye800. Conservare le soluzioni al buio condizioni e l&#39;uso entro 6 ore dalla ricostituzione. </li><li> Inserire animale in una scatola di induzione e sedare con isoflurano. </li><li> Una volta che l&#39;animale è in uno stato di anestesia profonda (monitorato con toe-pinch manovra), animale sedato posto su un lato su un pannolino / fluff pad naso e la posizione in un cono collegato gas isoflurano. </li><li> Spegni le luci (quindi la camera èscuro). Se necessario, una piccola luce alogena scrivania può essere utilizzato per una piccola quantità di luce per vedere iniezioni. </li><li> Utilizzando una siringa da insulina con un ago di calibro 31, iniettare ID 5 pl a 50 pl di ICG o CabD-IRDye800 nel dorso di ciascuna zampa posteriore e / o sul lato sinistro e destro della base della coda, a seconda l&#39;area di interesse (vedi Discussione). Ogni dose iniettata può variare 0,083-1,25 mg / kg (ICG) o 0,113-1,7 mg / kg (CabD-IRDye800). Volumi di iniezione varia con il ceppo animale e sito di iniezione. Per topi atimici, il volume di iniezione può essere 5 microlitri (zampa posteriore) o 10 microlitri (base della coda). Se animale non è sotto il sistema di imaging per l&#39;iniezione (s), collocare l&#39;animale sotto il sistema di imaging immediatamente dopo l&#39; iniezione (s). </li><li> Se non si vede l&#39;assorbimento colorante nei vasi linfatici, passo 2,5 dovrà essere ripetuta, se necessario per protocollo animale. </li><li> Una volta che si vedono vasi linfatici, coprire il sito di iniezione con nastro isolante nero o nero paper. </li><li> Acquisire le immagini linfatiche per un massimo di 1 ora con V + software + e un piccolo animale, NIRF sistema di imaging. (Gli animali vengono sedati con isoflurano e respirazione sono monitorati mentre le immagini stanno acquisendo.) Mentre per piccoli animali, imager NIRF sono disponibili in commercio, ci avvaliamo di un personalizzato, piccolo sistema animale NIRF immagini costituito da un 785-nm diodo laser (1005-78503-9mm , intenso, North Brunswick, NJ) dotato di una lente asferica (C24TME-B, Thorlabs, Newton, NJ), diffusore (ED1-C20, Thorlabs), e filtro (LD01-785/10-25, Semrock, Rochester, NY ) per creare un campo uniforme di eccitazione che illumina l&#39;animale a un tasso incidente fluenza inferiore a 1,4 mW per centimetro quadrato 10. Un elettrone moltiplicando charged-coupled dispositivo (EMCCD, PhotonMax512, Princeton Instruments, Trenton, NJ) sistema di telecamere con due 830-nm (filtri AND11333, Andover Corp., Salem, NH) e da 28 mm, obiettivo Nikkor (1992, Nikon, Melville, NY) viene utilizzato per catturare le immagini linfatici con integrazione times di 200 msec per immagini dinamiche e 800 msec per l&#39;imaging statico 5. Vedere la Figura 1 per la configurazione del sistema, la tabella per ulteriori dettagli di ogni componente, e la discussione per una breve discussione delle proprietà imager chiave. </li><li> Consentire agli animali di recuperare su una piastra elettrica o sotto una lampada di calore e ritornano nella loro gabbia, o eutanasia. </li><li> Analizzare le immagini utilizzando ImageJ o software MATLAB. Vedere la Figura 6. </li></ol>

<ol><li>Alitalo, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lymphatic+vasculature+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">The lymphatic vasculature in disease.</a> Nat. Med. 17, 1371-1380 (2011).</li>
<li>Rasmussen, J. C., Tan, I. C., Marshall, M. V., Fife, C. E., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+imaging+in+humans+with+near-infrared+fluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic imaging in humans with near-infrared fluorescence.</a> Curr. Opin. Biotechnol. 20, 74-82 (2009).</li>
<li>Rasmussen, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+Lymphatic+Architecture+and+Dynamic+Transport+Imaged+Using+Near-infrared+Fluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Transl.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Human Lymphatic Architecture and Dynamic Transport Imaged Using Near-infrared Fluorescence.</a> Transl. Oncol. 3, 362-372 (2010).</li>
<li>Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translation+of+near-infrared+fluorescence+imaging+technologies%3A+emerging+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Med%22%5BJournal%5D)">Translation of near-infrared fluorescence imaging technologies: emerging clinical applications.</a> Annu. Rev. Med. 63, 217-231 (2012).</li>
<li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+quantitative+imaging+of+lymph+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphat.+Res.+Biol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive quantitative imaging of lymph function in mice.</a> Lymphat. Res. Biol. 5, 219-231 (2007).</li>
<li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+phenotyping+with+near-infrared+fluorescence+lymphatic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Mouse phenotyping with near-infrared fluorescence lymphatic imaging.</a> Biomed Opt Express. 2, 1403-1411 (2011).</li>
<li>Marshall, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+fluorescence+imaging+in+humans+with+indocyanine+green%3A+a+review+and+update%5BTitle%5D)+AND+%22The+Open+Surgical+Oncology+Journal%22%5BJournal%5D)">Near-infrared fluorescence imaging in humans with indocyanine green: a review and update.</a> The Open Surgical Oncology Journal. 2, 12-25 (2010).</li>
<li>Davies-Venn, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Albumin-Binding+Domain+Conjugate+for+Near-Infrared+Fluorescence+Lymphatic+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Albumin-Binding Domain Conjugate for Near-Infrared Fluorescence Lymphatic Imaging.</a> Mol. Imaging Biol. , (2011).</li>
<li>Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+imaging+of+lymph+function%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantitative imaging of lymph function.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, 3109-3118 (2007).</li>
<li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+lymphatic+imaging+in+tumor-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Functional lymphatic imaging in tumor-bearing mice.</a> J. Immunol. Methods. 360, 167-172 (2010).</li>
<li>Karlsen, T. V., McCormack, E., Mujic, M., Tenstad, O., Wiig, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+quantification+of+lymph+flow+in+mice+and+rats+by+imaging+depot+clearance+of+near-infrared+albumin%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive quantification of lymph flow in mice and rats by imaging depot clearance of near-infrared albumin.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 302, 391-401 (2012).</li>
<li>Zhou, Q., Wood, R., Schwarz, E. M., Wang, Y. J., Xing, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+lymphatic+imaging+demonstrates+the+dynamics+of+lymph+flow+and+lymphangiogenesis+during+the+acute+versus+chronic+phases+of+arthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Near-infrared lymphatic imaging demonstrates the dynamics of lymph flow and lymphangiogenesis during the acute versus chronic phases of arthritis in mice.</a> Arthritis Rheum. 62, 1881-1889 (2010).</li>
<li>Adams, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+evidence+of+lymphatic+function+improvement+after+advanced+pneumatic+compression+device+treatment+of+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Direct evidence of lymphatic function improvement after advanced pneumatic compression device treatment of lymphedema.</a> Biomed. Opt. Express. 1, 114-125 (2010).</li>
<li>Tan, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+lymphatic+contractile+function+after+manual+lymphatic+drainage+using+near-infrared+fluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Phys.+Med.+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Assessment of lymphatic contractile function after manual lymphatic drainage using near-infrared fluorescence imaging.</a> Arch. Phys. Med. Rehabil. 92, 756-764 (2011).</li>
<li>Lapinski, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RASA1+maintains+the+lymphatic+vasculature+in+a+quiescent+functional+state+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">RASA1 maintains the lymphatic vasculature in a quiescent functional state in mice.</a> J. Clin. Invest. 122, 733-747 (2012).</li>
<li>Maus, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+fluorescence+imaging+of+lymphatics+in+head+and+neck+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Head+Neck%22%5BJournal%5D)">Near-infrared fluorescence imaging of lymphatics in head and neck lymphedema.</a> Head Neck. 34, 448-453 (2012).</li>
<li>Galanzha, E. I., Tuchin, V. V., Zharov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+small+animal+mesentery+models+for+in+vivo+flow+cytometry%2C+dynamic+microscopy%2C+and+drug+screening%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Advances in small animal mesentery models for in vivo flow cytometry, dynamic microscopy, and drug screening.</a> World J. Gastroenterol. 13, 192-218 (2007).</li>
<li>Schramm, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cervical+lymph+node+preparation%3A+a+novel+approach+to+study+lymphocyte+homing+by+intravital+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Inflammation+research+%3A+official+journal+of+the+European+Histamine+Research+Society%22%5BJournal%5D)">The cervical lymph node preparation: a novel approach to study lymphocyte homing by intravital microscopy.</a> Inflammation research : official journal of the European Histamine Research Society. 55, 160-167 (2006).</li>
<li>Hall, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+prostate+cancer+lymph+node+metastases+with+a+multimodality+contrast+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Imaging prostate cancer lymph node metastases with a multimodality contrast agent.</a> Prostate. 72, 129-146 (2012).</li>
<li>Zhu, B., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+excitation+leakage+and+maximizing+measurement+sensitivity+for+molecular+imaging+with+near-infrared+fluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Innovat.+Opt.+Health+Sci%22%5BJournal%5D)">Minimizing excitation leakage and maximizing measurement sensitivity for molecular imaging with near-infrared fluorescence.</a> J. Innovat. Opt. Health Sci. 4, 301-307 (2011).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare, ma alcuni autori sono elencati su un brevetto.

Usiamo una consuetudine, piccolo sistema animale NIRF immagini per catturare immagini di vasi linfatici etichettati nei topi. Per costruire film di circolazione linfatico, 300 o più immagini sono raccolte. Per l&#39;analisi funzionale dei vasi linfatici da film, ROI due o più sono disegnata a mano lungo un vaso linfatico. Le dimensioni della ROI sono mantenute costanti per ciascun recipiente e sono approssimativamente il diametro del vaso. Mentre risoluzione animale intero territorio può rappresentare vasi linfatici flu...

<table border="1"><tbody><tr><td> Solutions, reagenti e attrezzature </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commenti </td></tr><tr><td> Verde indocianina (ICG) </td><td> Patheon Italia SPA </td><td> NDC 25431-424-02 </td><td> Ricostituire a 645 pM (5 μg/10 mL) </td></tr><tr><td> Ciclico dominio di legame (&#39;Abd) </td><td> Bachem </td><td> Costume </td><td> Ricostituire a 200 pM (6.8 μg/10 mL) </td></tr><tr><td> IRDye800 </td><td> Li-COR </td><td> IRDye 800CW </td><td> Ricostituire secondo le istruzioni del produttore; coniugare con &#39;Abd a concentrazioni equilmolar </td></tr><tr><td> Acqua sterile </td><td> Hospira, Inc., Lake Forest, IL </td><td> NDC 0409-4887-10 </td><td></td></tr><tr><td> NAIR </td><td> Church &amp; Dwight Co.,Inc. </td><td> Negozi locali </td><td> <a href="http://www.nairlikeneverbefore.com" target="_blank">www.nairlikeneverbefore.com</a> </td></tr><tr><td> Imaging System (componenti sotto) </td><td> Center for Molecular Imaging </td><td> N / A </td><td> Custom-costruito nei nostri laboratori. </td></tr><tr><td> Electron moltiplicatore di Charge-Coupled Device (EMCCD) fotocamera </td><td> Princeton Instruments, Trenton, NJ </td><td> Photon Max. 512 </td><td></td></tr><tr><td> Nikon obiettivo </td><td> Nikon Inc., Melville, NY </td><td> Modello n 1992, Nikkor 28 millimetri </td><td></td></tr><tr><td> Filtro ottico </td><td> Andover Corp., Salem, NH </td><td> ANDV11333 </td><td> Due filtri passa-banda 830.0/10.0 nm vengono utilizzati davanti alla lente </td></tr><tr><td> 785-nm laser a diodi </td><td> Intenso Ltd, North Brunswick, NJ </td><td> 1005-9MM-78503 </td><td> 500 mW di uscita ottica </td></tr&gt; <tr><td> Ottiche collimanti </td><td> Thorlabs, Newton, NJ </td><td> C240TME-B </td><td> Collima uscita laser prima filtro di pulitura </td></tr><tr><td> Clean-up filtro </td><td> Semrock, Inc., Rochester, NY </td><td> LD01-785/10-25 </td><td> Rimuove emissione laser in banda di fluorescenza </td></tr><tr><td> Diffusore ottico </td><td> Thorlabs, Newton, NJ </td><td> ED1-C20 </td><td> Diffonde il laser sull&#39;animale </td></tr><tr><td> V + + </td><td> Ottica digitale, Browns Bay, Auckland, Nuova Zelanda </td><td> Versione 5.0 </td><td> Software utilizzato per controllare il sistema di telecamere e di salvare le immagini al computer. <a href="http://digitaloptics.net/" target="_blank">http://digitaloptics.net/</a> </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Software analitica Uno dei seguenti pacchetti software può essere utilizzato per l&#39;analisi delle immagini </td></tr><tr><td> ImageJ </td><td> Istituto Nazionale dituti di salute, Bethesda, MD </td><td> Una versione più aggiornata </td><td> Gratuito disponibile a <a href="http://rsbweb.nih.gov/ij/" target="_blank">http://rsbweb.nih.gov/ij/</a> </td></tr><tr><td> MATLAB </td><td> MathWorks, Natick, MA </td><td> Versione 2008a o successiva </td><td> <a href="http://www.mathworks.com/" target="_blank">http://www.mathworks.com/</a> </td></tr></tbody></table>

non invasiva di imaging ottico del sistema vascolare linfatico di un mouse

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

Il sistema vascolare linfatico è un componente importante del sistema circolatorio che mantiene l&#39;omeostasi fluido, fornisce la sorveglianza immunitaria, e media l&#39;assorbimento di grassi nell&#39;intestino. Eppure, nonostante la sua funzione critica, non vi è la comprensione relativamente poco di come il sistema linfatico si adatta a servire queste funzioni in materia di salute e malattia 1. Recentemente, abbiamo dimostrato la capacità di architettura dinamica linfatica immagine e linfa azione &quot;pompaggio&quot; in soggetti umani normali e anche a persone che soffrono di disfunzione linfatica mediante somministrazione traccia di un vicino infrarosso fluorescente (NIRF) colorante e un costume, Gen III- intensificata sistema di imaging 2-4. NIRF di imaging hanno mostrato cambiamenti drammatici in architettura linfatica e la funzione con la malattia umana. Non è ancora chiaro come questi cambiamenti si verificano e di nuovi modelli animali che sono in fase di sviluppo per chiarire la loro base genetica e molecolare. In questo protocollo, presentiamo linfatico NIRF, small animale Imaging 5,6 utilizzando verde indocianina (ICG), un colorante che è stato usato per 50 anni nell&#39;uomo 7, e un colorante marcato NIRF ciclico dominio di legame (CabD-IRDye800) peptide che si lega preferenzialmente topo e albumina umana 8 . Circa 5,5 volte più luminoso di ICG, &#39;Abd-IRDye800 ha un profilo simile gioco linfatico e può essere iniettato in piccole dosi di ICG per ottenere segnali NIRF sufficienti per l&#39;imaging 8. Poiché sia bind &#39;Abd-IRDye800 e ICG all&#39;albumina nello spazio interstiziale 8, entrambi possono descrivere trasporto attivo le proteine ​​in e nei vasi linfatici. Intradermica (ID) iniezioni (microlitri 5-50) di ICG (645 uM) o CabD-IRDye800 (200 pM) in soluzione salina sono somministrati al dorso di ciascuna zampa posteriore e / o il lato sinistro e destro della base del coda di un topo anestetizzato-isoflurano. La concentrazione di colorante conseguente animale è 83-1,250 mcg / kg per ICG o 113-1,700 mg / kg per&#39;Abd-IRDye800. Subito dopo le iniezioni, l&#39;imaging funzionale linfatico è condotto per un massimo di 1 ora con un personalizzato, piccolo sistema animale NIRF imaging. Risoluzione animale intero territorio può rappresentare vasi linfatici fluorescenti di 100 micron o meno, e le immagini di strutture fino a 3 cm di profondità possono essere acquisite 9. Le immagini sono acquisite in V + software + e analizzati utilizzando il software ImageJ o MATLAB. Durante l&#39;analisi, consecutivi regioni di interesse (ROI) comprende l&#39;intero diametro nave sono disegnati lungo un vaso linfatico dato. Le dimensioni di ogni ROI sono mantenute costanti per un determinato peschereccio e intensità NIRF è misurato per ciascuna ROI per valutare quantitativamente &quot;pacchetti&quot; di linfa si muove attraverso le navi.

Esempio di Imaging linfatico NIRF in Mouse Quando ICG o CabD IRDye800-ID viene iniettato alla base della coda di un topo normale, la vascolarizzazione linfatica tra il sito di iniezione alla base della coda e il linfonodo inguinale (LN) dovrebbe essere immediatamente visualizzata. Poco dopo l&#39;iniezione (pochi secondi o minuti), il vaso linfatico tra la LN inguinale e ascellare LN deve essere visualizzato come visibile in figura 2. Poiché i linfatici nei topi variano da un a...

Tecniche di imaging di recente sviluppate utilizzando fluorescenza nel vicino infrarosso (NIRF) può aiutare a chiarire il ruolo del sistema linfatico gioca in metastasi del cancro, la risposta immunitaria, la riparazione delle ferite, e altre malattie associate linfatico.

Non invasiva di imaging ottico del sistema vascolare linfatico di un mouse

Il sistema vascolare linfatico è una componente importante del sistema circolatorio che mantiene l'omeostasi dei fluidi, fornisce sorveglianza immunitaria e...

L'obiettivo generale di questa procedura è dimostrare come eseguire l'imaging non invasivo dei linfatici in piccoli animali utilizzando un sistema di imaging a fluorescenza nell'infrarosso vicino. Questo viene realizzato innanzitutto ricostituendo il colorante fluorescente alla concentrazione appropriata immediatamente prima dell'imaging. Successivamente, l'animale sedato viene iniettato per via intradermica con il colorante nel sito prescelto.Questo permetterà la visualizzazione dei vasi linfatici di interesse nell'ultima fase. Vengono acquisite immagini dei vasi e successivamente analizzate. In definitiva, infrarosso vicino.L'imaging linfatico fluorescente può essere utilizzato per dimostrare e rivelare la funzione e l'architettura della vascolarizzazione linfatica. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sul ruolo svolto dal sistema linfatico negli animali sani, può essere applicato anche in diverse condizioni patologiche, come metastasi tumorali, risposta immunitaria acuta e cronica, guarigione delle ferite e modelli transgenici.Modelli di disturbi associati al sistema linfatico. Nel giorno dell'acquisizione delle immagini, iniziare ricostituendo incy e green con acqua

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Impara a eseguire l'imaging non invasivo del sistema linfatico nei piccoli animali utilizzando la fluorescenza nel vicino infrarosso. Questo metodo consente di visualizzare i vasi linfatici e studiare il loro ruolo in processi biologici e patologie.

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