15.8
Mutagénesis in vitro
- [Instructor] Los científicos pueden inactivar o inhibir
un gen en los animales, comúnmente ratones,
para aprender más acerca de la función del gen,
por lo general con su sustitución por un vector diana,
una pieza de ADN modificada.
El vector diana posee secuencias homólogas,
idénticas, a las de antes y después del gen.
Por lo general, también posee un marcador de selección
positiva como el gen de resistencia a la neomicina NeoR
en medio y un marcador de selección negativa
como el gen de timidina cinasa TK en un extremo.
Cuando es introducido en células madre embrionarias,
el vector sustituye el gen mediante una recombinación
homóloga que sucede naturalmente entre fragmentos de ADN
con secuencias similares.
Las células cuyo gen se sustituyó correctamente
contendrán el marcador positivo pero no el negativo,
permitiendo identificarlas en el cultivo.
Dichas células se introducen en el embrión de un ratón
y se implantan en el útero de una hembra.
El ratón resultante posee una combinación de células
sanas y células con el gen inactivado en el cromosoma.
Los ratones son cruzados para procrear los llamados
con genes inactivados, homocigotos por la inactivación
de todas las células.
Para aprender más sobre la función de un gen, los investigadores pueden observar lo que sucede cuando el gen se desactiva o se “elimina”, mediante la…
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