Cromatografía en capa fina

Fuente: Lara Al Hariri en la Universidad de Massachusetts Amherst, MA, EE.UU

1. Preparación de solucionesexpandir

   Aquí, mostramos la preparación del laboratorio para 10 estudiantes trabajando en parejas, con algo de exceso. Ajuste las cantidades según sea necesario.

   • Antes de empezar, ponte una bata de laboratorio, gafas de seguridad y guantes de nitrilo. Trabajará con hexano, etanol y acetato de etilo, que impregnan los guantes finos de nitrilo en cuestión de minutos, así que cámbielos de inmediato si les cae algún solvente.
   • Prepare soluciones de ~1 mg/mL de éter de butil fenilo, fenol, ácido benzoico, aspirina, cafeína y acetaminofén. Utilice una balanza analítica o una micropipeta para medir aproximadamente 10 mg o 10,7 μL de éter de butil fenilo en un vial de vidrio de 20 ml. nota: El éter de butilo fenilo es un líquido a temperatura ambiente y debe manipularse en una campana extractora.
   • Mida 10 mL de etanol, agréguelo al vial y etiquételo como '1 mg/mL de éter fenilo de butilo en etanol'.
   • Prepare las otras cinco soluciones, empezando por el fenol. Tara un frasco de vidrio de 20 ml y mide 10 mg de fenol en él.
   • Luego, agregue 10 mL de etanol al vial y revuelva la mezcla con una varilla de vidrio hasta que el fenol se haya disuelto por completo.
   • Tapa el vial y etiquétalo como '1 mg/mL de fenol en etanol'. Repita este proceso para preparar soluciones de 1 mg/ml de ácido benzoico, aspirina, cafeína y paracetamol. Guarde los viales en la capucha del instructor o en un espacio de trabajo común.
   • Prepare las tres soluciones desconocidas de analgésicos disponibles comercialmente en etanol. Las formulaciones de los comprimidos pueden variar, por lo que es posible que desee pesar los comprimidos de antemano para estimar el porcentaje en peso de los ingredientes activos.
   • Use un mortero pequeño para triturar una tableta de acetaminofén hasta convertirla en polvo. Mida de 10 a 15 mg del polvo en un vial de vidrio de 20 ml.
   • Luego, agregue 10 mL de etanol absoluto al vial y revuelva la mezcla con una varilla de vidrio limpia durante 1 – 3 min. Está bien si queda algo sólido en el fondo del vial.
   • Tapa el vial y etiquétalo como 'Desconocido 1'. Deseche el polvo restante y limpie y seque a fondo el mortero.
   • Use 10 – 15 mg de una tableta de aspirina triturada para hacer la solución desconocida 2 y 30 – 40 mg de una tableta triturada que contiene una mezcla de acetaminofén, aspirina y cafeína para hacer la solución desconocida 3 de la misma manera. Almacene las soluciones desconocidas con las soluciones conocidas.
   • Haga las mezclas de solventes que los estudiantes usarán como eluyentes. Prepare 100 mL de una mezcla de 60% de hexano y 40% de acetato de etilo. Mida 60 ml de hexano y viértalo en un vaso de precipitados de 250 o 400 ml. Agregue 40 mL de acetato de etilo y revuelva la mezcla hasta que parezca homogénea.
   • Etiquete un frasco de 150 ml '60% hexano, 40% acetato de etilo (v/v)' y use un embudo para transferir la solución. Tapa la botella antes de dejarla a un lado.
   • Haz 100 mL de una mezcla de 90% de acetato de etilo y 10% de hexano. Mida 10 ml de hexano y viértalo en un vaso de precipitados de 250 o 400 ml. A continuación, añade 90 mL de acetato de etilo y remueve bien la mezcla.
   • Etiqueta un frasco de 150 ml como '90% acetato de etilo, 10% hexano (v/v)'. Transfiera la mezcla a la botella y táplate herméticamente. Guarde los disolventes y las mezclas de disolventes en un armario de inflamables.
2. Preparación del LaboratorioExpandir
   • Prepare u obtenga contenedores de residuos para vidrio, yodo y residuos orgánicos no halogenados. Asegúrese de que cada fregadero de laboratorio tenga un suministro de toallas de papel.
   • Enchufa y prueba una pequeña lámpara UV de 254 nm en un área compartida.
   • Coloque una placa calefactora en una campana extractora central, etiquete un vaso de precipitados de 500 ml como 'cámara de yodo' y coloque aproximadamente 1 – 2 g de yodo en el vaso de precipitados. Cúbralo con un vidrio de reloj grande y colóquelo en la placa calefactora.
   • Coloque la siguiente cristalería y equipo en cada estación de laboratorio del estudiante (sugerimos que los estudiantes trabajen en parejas):

     3 frascos de vidrio de 50 ml con tapa de rosca

     3 cilindros graduados de 10 mL

     1 Lápiz

     1 Rotulador

     1 par de pinzas

     1 Regla pequeña con incrementos métricos

   • Etiqueta una botella de 150 ml como '100% hexano', vierte unos 100 mL de hexano en la botella y tápala herméticamente. Guarde el frasco de hexano y coloque las mezclas de hexano y acetato de etilo en la tapa de disolvente con el frasco de hexano puro.
   • Organice las seis soluciones conocidas y las tres soluciones desconocidas en un banco compartido.
   • Coloque cerca recipientes de capilares de vidrio desechables, papeles de filtro de tamaño mediano y placas de TLC.
   • Al comienzo del laboratorio, asigna aleatoriamente un compuesto desconocido a cada grupo de estudiantes.
   • Una vez que algunos estudiantes estén aproximadamente a la mitad del primer desarrollo, caliente el yodo a 110 °C en la placa calefactora.
   • Después del laboratorio, deje que el vaso de precipitados se enfríe y deseche los residuos de yodo de manera adecuada.