Cromatografía en capa fina
La cromatografía en capa fina, o TLC, es una técnica utilizada para separar compuestos orgánicos en función de las diferencias en sus polaridades. Hay tres componentes de un sistema TLC: la fase estacionaria, el soluto y el solvente de desarrollo.
La fase estacionaria es la superficie en la que se separarán los compuestos, que suele estar compuesta por un gel de sílice extremadamente polar. Los compuestos o mezclas que se analizan son los solutos. Las soluciones diluidas de los solutos se ven en un borde de la placa utilizando capilares delgados.
A continuación, la parte inferior de la placa se sumerge en el disolvente de revelado, que suele ser un disolvente orgánico menos polar que la fase estacionaria. El disolvente se desplaza por la placa por capilaridad. A medida que el solvente pasa a través de las manchas de soluto, arrastra algo de cada soluto consigo. Esta mezcla soluto-disolvente es la fase móvil.
La parte superior de la fase móvil se denomina frente solvente. A medida que la fase móvil viaja por la placa, las moléculas de soluto y solvente se adhieren temporalmente a la fase estacionaria en función de su polaridad.
Los solutos polares más polares son atraídos fuertemente por la fase estacionaria, por lo que se adhieren con más frecuencia y permanecen atascados durante un tiempo. Los solutos menos polares se adhieren con menos frecuencia y no permanecen atascados por mucho tiempo. Esto significa que menos solutos polares pasan más tiempo en la fase móvil que más solutos polares. En otras palabras, los solutos menos polares viajan más rápido que los solutos más polares.
Para lograr una buena separación entre los compuestos, el solvente debe ser lo suficientemente polar como para mover el soluto más polar. Estos son algunos solventes comunes en orden creciente de polaridad. A veces, se combinan dos disolventes para lograr la polaridad deseada.
Debido a que la mayoría de los compuestos orgánicos son blancos o incoloros, las placas TLC generalmente contienen un compuesto fluorescente. Bajo la luz ultravioleta, los compuestos orgánicos aparecerán como manchas oscuras en la placa brillante.
Una vez que se visualizan los compuestos, se puede medir qué tan lejos viajaron y calcular el factor de retardo, o Rf, para cada uno. Este valor es la distancia recorrida por el soluto dividida por la distancia total recorrida por la fase móvil.
Si el solvente se elige correctamente, cada soluto tendrá una Rf claramente diferente. Esto nos permite identificar los compuestos componentes en las mezclas haciendo coincidir los valores de Rf con los compuestos conocidos.
En este laboratorio, usará TLC para determinar el Rf de varios compuestos conocidos y, a continuación, usará esos valores de Rf para determinar la identidad de un compuesto desconocido.
cromatografía
La cromatografía es una técnica utilizada en química orgánica para separar compuestos en una mezcla en función de sus diferencias de sol…
Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Todos los derechos reservados.