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PCR - Reacción en Cadena de Polimerasa
- [Instructor] El objetivo de la PCR, o
reacción en cadena de la polimerasa,
es amplificar una secuencia genética.
En este ejemplo, un gen de interés
será amplificado a partir de ADN purificado.
Para realizar la amplificación,
se requiere una polimerasa para sintetizar el nuevo ADN.
Un cebador, un trozo corto de ADN monocatenario
que comparte homología con el gen de interés,
también es necesario.
Finalmente, nucleótidos individuales llamados
deoxinucleósidos trifosfatos, o dNTPs,
se utilizan para hacer la nueva hebra.
El primer paso en la PCR es calentar la mezcla,
que desnaturaliza el ADN.
A continuación, se enfría la reacción
y los cebadores se hibridarán a su región homóloga.
Una vez unidos, la reacción se calienta
a una temperatura óptima para la polimerasa.
La polimerasa reconoce entonces el complejo de ADN cebador
y comienza la síntesis de la nueva cadena.
utilizando los dNTPs en la solución.
La reacción se calienta y continúa como descrito
a través de ciclos adicionales.
Después del tercer ciclo,
hay ocho copias totales del gen.
Después del cuarto ciclo, 16 copias,
y en el quinto ciclo, 32 copias.
El número de ciclos continuará creciendo exponencialmente.
Después de 30 ciclo
Descripción general
La reacción en cadena de la polimerasa, o PCR, es una técnica ampliamente utilizada para copiar segmentos de ADN. Debido a la ampl…
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