Cromatografía líquida de alto rendimiento: proceso de elución

En un instrumento de HPLC, se almacenan múltiples disolventes en depósitos de disolventes que facilitan la variación de la composición de la fase móvil y, por tanto, su polaridad.

Primero, el solvente se filtra y desgasifica para eliminar los gases disueltos, antes de ser bombeado.

Entre las bombas de alta presión utilizadas en HPLC, la bomba recíproca es la más utilizada.

Esta bomba se basa en un pequeño pistón con dos válvulas de retención unidireccionales.

Cuando el pistón se empuja hacia atrás, el solvente fluye a través de la válvula de entrada y se bombea a través de una válvula de salida durante la carrera de avance.

La composición de la fase móvil es constante en la elución isocrática, mientras que en la elución en gradiente, se varía para facilitar la separación.

Aquí, bombas binarias independientes conectadas a una cámara de mezcla regulan el caudal y la polaridad de la fase móvil.

Finalmente, la muestra se inyecta en la fase móvil que fluye a través de un inyector de bucle antes de que ingrese a la columna.