1.5
Técnica de tinción diferencial
La tinción diferencial distingue los microorganismos en función de las propiedades de la pared celular, lo que ayuda a la identificación y clasificación de las bacterias.
La tinción de Gram clasifica las bacterias como grampositivas o gramnegativas por su capacidad de retener el cristal violeta después de la decoloración con alcohol.
Un delgado frotis de cultivo microbiano se extiende en un portaobjetos, se seca al aire y se fija con calor.
El frotis se tiñe con violeta cristalino, se lava con agua y se trata con yodo, formando un complejo de violeta cristalino y yodo.
Se usa alcohol para decolorar esta mancha hasta que la escorrentía sea clara, seguida de un enjuague con agua.
Las bacterias grampositivas retienen la mancha púrpura debido a su gruesa capa de peptidoglicano.
Por el contrario, las bacterias gramnegativas pierden la mancha púrpura a medida que el alcohol altera la membrana externa y lava el complejo cristalino de violeta-yodo.
La safranina se utiliza para contrarrestar las bacterias gramnegativas de color rosa, mientras que las bacterias grampositivas permanecen de color púrpura.
La tinción acidorresistente detecta las especies de Mycobacterium, cuyas paredes celulares cerosas ricas en ácido micólico resisten la decoloración.
Las bacterias acidorresistentes retienen carbol fucsina, un tinte rojo, mientras que las células no acidorresistentes generalmente se contratiñen con azul de metileno.
La tinción diferencial es una técnica microbiológica fundamental que aprovecha las variaciones en las estructuras de la pared celular para clasificar…
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