Apareamiento y estadificación de los huevos: un método para generar embriones y clasificarlos por etapa de desarrollo

Abstract

Fuente: Hostelley T.L., et al. Preparación y análisis de muestras de datos de expresión génica basados en RNASeq de pez cebra. J. Vis. Exp. (2017)

El artículo describe un protocolo para generar embriones de pez cebra a través del apareamiento natural y la clasificación de sus etapas de desarrollo. El protocolo se utiliza además para el análisis de células β pancreáticas mediante el uso de peces transgénicos.

Protocol

1. Generación de embriones a través del apareamiento natural

1. Cultivo de embriones hasta los 3 meses de edad, madurez reproductiva.
2. Separe los peces machos y hembras adultos de la cepa deseada en tanques de apareamiento divididos la noche anterior a la recolección de embriones, y agregue 2 machos y 3 hembras a cada tanque><. NOTA: El uso de la cepa reportera fluorescente transgénica insulina2a:mCherry permitió el análisis de células β pancreáticas.
3. Transfiera los peces al tanque de apareamiento con agua dulce del sistema y retire el divisor inmediatamente después de que se enciend....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
ins2a:mCereza	ZIRC	ZL1483
Tanques de acoplamiento Juego de tanques de cruce de 1.0L	Acuareo	ZHCT100
Microscopio de disección	Zeiss