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Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Imagen de la rata embarazada
- Coloque el ratón en posición supina en la plataforma de monitoreo. El ratón recibe continuamente anestésico isoflurano (entre 1,5 y 2,5%) y oxígeno (1 L/min) a través del cono nasal. Pega suavemente todas las patas a las almohadillas de control de la frecuencia cardíaca en la plataforma.
- Aplique 1-2 ml de gel de transmisión de ultrasonido en el abdomen.
- Usando la etapa motora manual, coloque la sonda de ultrasonido en la parte inferior del abdomen.
- Localiza la vejiga, que debe aparecer como un círculo oscuro lleno de líquido justo cefálico a la abertura vaginal.
- Una vez localizada la vejiga, se mueve la sonda cefálica muy lentamente para visualizar el útero embarazado, que debe aparecer como una forma cilíndrica con áreas redondas en los sitios de gestación. Esto se puede describir como perlas en una cadena.
- Una vez que se haya identificado el útero embarazada, comience la toma de imágenes en 2D.
>2. La imagen de ultrasonido 2D (Figura 1)
- Una vez que se ha identificado el útero de la embarazada, se comienza en el sitio de la gestación más cercano a la vejiga y se mueve lenta y secuencialmente la cefálica para determinar el número y la ubicación de los sitios de la gestación.
- Si se visualiza el riñón, el bazo o el hígado, vuelva a colocar la sonda más cerca de la caudal (más cerca de la vejiga) ya que el usuario ha ido demasiado lejos de la cefalia.
- Imagine el cuerno uterino contralateral de la misma manera.
- Congele la imagen cuando el marco de ultrasonido esté en el centro del sitio de implantación/embarazo para guardarla para análisis y mediciones posteriores.
NOTA: La imagen tarda menos de un segundo en congelarse y guardarse para su posterior análisis.
- Mida la distancia de implantación utilizando la reacción de decidualización hiperecoica como marcador haciendo clic manualmente en la herramienta "medir" primero y luego haciendo clic en la ubicación de un sitio de implantación. A continuación, arrastre el cursor al siguiente sitio de implantación y haga clic para dibujar una línea a la que el ordenador informará automáticamente de su distancia. A continuación, el software informará de cuál es la medición manual. Este paso no está computarizado, sino que depende del usuario para marcar la distancia entre los sitios decidualizados dibujando una línea entre los sitios decidualizados, para los cuales el programa proporcionará una medición.
- Mida el tamaño de la implantación, el tamaño del saco gestacional y el tamaño del polo fetal.