Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
3.3K visualizaciones
⸱
8 de julio de 2025
Fuente: Smith-Page, K. et al. Aislamiento e identificación conjuntivales comensales en ratones. J. Vis. Exp. (2021)
Este video describe una técnica basada en hisopos para aislar bacterias comensales viables de la conjuntiva ocular. La técnica se puede utilizar para perfilar el microbioma bacteriano comensal de la conjuntiva, que desempeña un papel defensivo contra los patógenos.
Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
>1. Preparación de hisopos oculares, configuración del campo de trabajo, hisopado ocular de ratón y enriquecimiento de muestras
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Figura 1: Hisopo ocular interno.
(A) Se sostuvo un trozo delgado de guata de algodón tirado de aproximadamente 1 cm entre la punta del palillo estéril y el dedo índice y se hizo rodar el palillo mientras se mantenía una ligera presión contra el dedo índice hasta que el algodón se enrolló completamente sobre la punta del palillo. (B) Ejemplo de un .......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Punta de pipeta de 0,1 a 10 μl | Científico de EE. UU | 1110-300 | Autoclave antes de usar |
| Pipeta Eppendorf de 0,5 a 10 μl | Fisher Científico | Teléfono 13-690-026 | |
| Jeringa de 1 ml | Fisher Científico | BD309623 | 1 jeringa para cada grupo de hisopos oculares |
| Tubos Eppendorf de 1,5 ml | Científico de EE. UU | 1615-5500 | Autoclave antes de usar |
| Punta de pipeta de 1000 μ ml | Científico de EE. UU | 1111-2021 | Autoclave antes de usar |
| De 200 a 1000 μl de pipeta Gilson (P1000) | Fisher Científico | F123602G | |
| Aguja de 25 g | Fisher Científico | 14-826AA | 1 aguja por grupo de hisopo ocular |
| 3 % Peróxido de hidrógeno | Fisher Científico | S25359 | |
| Incubadora de 37 ° C | Equipos de laboratorio | ||
| 70 % de isopropanol | Fisher Científico | PX1840-4 | |
| Inyección de Ana-Sed (xilacina 100 mg/ml) | Salud Animal de Santa Cruz | SC-362949Rx | |
| Quemador Bunsen | Equipos de laboratorio | ||
| Toallas de papel limpias | Equipos de laboratorio | ||
| Moldeo de algodón/Algodón enrollado estéril | CVS | ||
| Ketamina (100 mg/ml) | Henry Schein | 9950001 | |
| ratón | Laboratorios Jackson | C57/BL6J | |
| Placas de Petri | Fisher Científico | 08-757-12 | Para placas de agar con sal de manitol |
| Medios de infusión cerebro-corazón RPI | Fisher Científico | 50-488525 | Prepare de acuerdo con las instrucciones y el autoclave |
| SteriFlip (0,22 μm de tamaño de poro de poliéster sulfona) | EMD/Millipore, Fisher Scientifc | SCGP00525 | Para esterilizar la anestesia |
| Jaula estéril para ratones | Equipos de laboratorio | ||
| Palillos de dientes (bambú redondo) | Elementos esenciales de la cocina | Autoclave antes de usar y preparación del hisopo | |
| Agar Tripticasa de Soja II con 5% de Placas de Sangre de Oveja | Fisher Científico | 4321261 | Conservar a 4 °C hasta que esté listo para usar |
| Gotas oftálmicas de un solo uso | CVS Pharmacy | Bausch and Lomb Soothe Gotas Lubricantes para los Ojos, 28 viales, 0.02 fl oz. cada uno |
