Modelado de la oclusión traqueal fetal transuterina en modelo murino: un procedimiento quirúrgico para la ligadura de la tráquea fetal en una ratón embarazada

Resumen

Fuente: Aydın, E. et al. Modelo de Oclusión Traqueal Fetal Transuterina en ratones. J. Vis. Exp. (2021)

Este video muestra el procedimiento de oclusión traqueal transuterina de un feto de ratón en una rata embarazada. Este modelo se puede utilizar para estudiar el impacto de la tráquea ocluida en el desarrollo pulmonar.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Laparotomía

1. Limpiar la superficie abdominal con alcohol y povidona yodada. Mantener las condiciones estériles durante toda la operación.
2. Realizar una incisión vertical para la laparotomía de madres embarazadas. Corta todas las capas por separado.
3. Identifica los cuernos uterinos de cada lado.
4. Determinar los fetos candidatos para la cirugía.
   nota: No opere a los fetos que están más cerca de la vagina.
5. Opere en dos fetos en cada cuerno uterino si hay un número par de fetos a cada lado (4 la mayoría de las veces), y en 1 feto en cada cuerno uterino si hay un número impar de útero (3 la mayoría de las veces).

>2. Oclusión traqueal (TO)

1. Utilice gafas de aumento de 2,5x para la visualización.
2. Coloque el cuerno uterino de forma transversal.
3. Tome a las crías, mirando hacia arriba, entre dos dedos usando los ojos de las crías y la cola como guía para posicionar al feto.
4. Aplique una presión suave sobre la cabeza del cachorro para permitir la extensión de la cabeza y, por lo tanto, la visualización del cuello.
5. Utilice una sutura de polipropileno 6.0 con una aguja atraumática para realizar la OT (Figura 1). Mantenga la placenta a un lado y lejos de los puntos de entrada y salida de la aguja.
6. Inserte la aguja transversalmente a través del costado del útero lejos de la placenta a través de la 1/3 de la parte anterior del cuello.
7. Mueva la aguja suavemente hasta la línea media del cuello y diríjala a la parte anterior, luego salga del cuello entre la tráquea y opuesta a la vaina carotídea y el útero.
8. Anudar la sutura, teniendo cuidado de mantener la integridad de las membranas y la pared uterina, y mantener el cordón umbilical seguro durante el anudado.

>3. Cierre de la pared abdominal

1. Reemplace el cuerno uterino en el abdomen.
2. Inyecte 2 mL de solución salina estéril tibia en la cavidad peritoneal antes del cierre.
3. Coloque una sutura de poliglactina 5/0 para cerrar la pared abdominal y cierre la piel con una sutura de seda que no corra.
4. Aplicar 0,1 mg/kg de buprenorfina por vía intraperitoneal para la analgesia, y permitir la recuperación de la madre en una incubadora caliente.

Resultados

Figura 1. Oclusión traqueal. (A) La sutura transuterina que pasa a través del cuello. (B) Representación esquemática de las estructuras después de que la sutura pasa a través y antes del nudo. Abreviaturas: C = Arteria carótida; J = Vena yugular; T = Tráquea; E = Esófago; V = Vértebra.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Buprenorfina	Por Farmacéutica	NDC 42023-179-05	Para anestesia regional
Lentes de aumento	Médico-Quirúrgico de EE. UU	SLR-250LBLK	Al menos 2,5 veces
Sutura de seda	Ethicon	VCP682G	4-0, 24 mm, de corte
Isoflurano	Halocarbon Ciencias de la Vida NDC	66794-017-25	Para anestesia regional
Sutura de polipropileno	Ethicon	Y432H	6-0, 13 mm 1/2c Punta cónica

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