Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Extracción quirúrgica del bloqueo cardiopulmonar.
- anestesia:
- Use una combinación de un sedante (xilacina) y un barbitúrico (pentobarbital).
nota: Se pueden utilizar diferentes cócteles anestésicos sin ningún efecto sobre los resultados experimentales.
- En primer lugar, sedar a los conejos sanos de Nueva Zelanda con una única inyección intramuscular de clorhidrato de xilacina (3-5 mg/kg). Asegúrese de que los conejos permanezcan tranquilos y relajados para permitir una mayor manipulación después de unos minutos de la inyección.
- Después de la sedación, utilice las venas marginales (laterales) del oído como acceso para anestesiar a los conejos con una inyección intravenosa de pentobarbital sódico (28 mg/kg).
- monitorización:
- Para evitar una anestesia insuficiente o una depresión excesiva de las funciones cardíacas y respiratorias, controle los siguientes parámetros. Para evaluar la profundidad de la anestesia, realice una prueba de pellizco en los dedos de los pies.
- Asegúrate de que la membrana mucosa esté de color rosa. Los tonos azules o grises indican hipoxia.
- Asegúrese de que la frecuencia cardíaca esté entre 120 y 135 latidos/min y que la temperatura corporal no baje de 36,5 °C.
- Colocación de animales:
- Afeita el torso del conejo y coloca al animal en la mesa de operaciones en posición supina. Coloque el sistema de ventilación cerca de la mesa, detrás de la cabeza del conejo, para permitir la conexión rápida de la cánula después de la traqueotomía y evitar daños tisulares.
- Incisión y traqueotomía:
- Diseccionar la piel con una incisión en la línea media ventral de 3-5 cm desde el diafragma hasta el cuello.
- Con las tijeras de operación, corte los 2/3 anteriores de la tráquea entre dos anillos de cartílago para insertar la cánula traqueal a través de la membrana fibrosa traqueal.
- Inserte un 5 mm (diámetro exterior; OD) cánula traqueal a través de la membrana fibrosa traqueal y use una sutura de seda 4-0 para fijarla cuidadosamente.
- Coloque fórceps o pinzas debajo de la tráquea para asegurarse de que la cánula no se doble contra la tráquea.
