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Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Accesos intravasculares
NOTA: Los accesos intravasculares deben establecerse en la vena yugular externa derecha, la vena yugular externa izquierda, la arteria carótida izquierda, la arteria femoral izquierda y la vena femoral derecha. En el cerdo, la vena yugular externa es mucho más grande que la vena yugular interna y, por lo tanto, de más fácil acceso. Todos los materiales necesarios para esta sección se muestran en la Figura 1A.
- Afeitar al animal en los sitios de punción para los accesos intravasculares.
- Desinfecte la piel con clorhexidina (o povidona yodada) y limpie con alcohol isopropílico. Repita durante dos ciclos más.
- Coloque un paño estéril en el área desinfectada con un orificio ubicado en el centro de la cubierta.
- Utilice un dispositivo de ultrasonido con una sonda lineal. Cubra la sonda con una cubierta estéril y use gel estéril para el examen vascular.
- Utilice un catéter venoso estéril de 17 G para perforar la piel y guiar la aguja hasta el posicionamiento intravascular mediante ecografía (Figura 1B, C).
- Reemplace la aguja con una guía utilizando la técnica de Seldinger. Retire el catéter venoso dejando solo la guía en la luz intravascular. A continuación, haga una pequeña incisión en la piel (~5 mm) adherida a la guía para facilitar la inserción de la vaina.
- Coloque una funda de 8 French (F) sobre la guía y en el recipiente de su elección (la técnica de Seldinger). Elija una vaina 8F en la vena yugular externa derecha (para el cateterismo cardíaco derecho) y en la arteria carótida izquierda (para el catéter con asa PV del ventrículo izquierdo). Es necesario suficiente lumen para evitar dañar los catéteres.
- Coloque una vaina 7F en la vena yugular externa izquierda.
- Coloque una vaina 7F en la arteria femoral izquierda. El acceso es para la medición invasiva de la presión arterial y la toma de muestras de gases en sangre.
- Coloque una vaina de 12F (o 14F si está disponible) en la vena femoral derecha para la inserción del balón en la vena cava inferior (IVC). Considere usar un dilatador en un enfoque de dos pasos para las vainas más grandes.
- Confirmar y controlar la posición de todas las vainas mediante la extracción de sangre (venosa o arterial, respectivamente) y el lavado fácil con solución salina isotónica. Las vainas están colocadas correctamente dentro de un vaso sanguíneo si uno puede extraer sangre sin resistencia.
- Fije todas las vainas con una sutura cutánea (talla 3.0) para evitar cualquier extracción accidental de una funda. Las suturas cutáneas se retirarán después de completar el protocolo junto con la extracción de las vainas.
- Conecte el acceso arterial femoral al transductor de presión y calibre a la presión atmosférica. Asegúrese de que esta configuración genere la forma correcta de la curva de presión arterial.
- Extraiga una muestra de sangre arterial de una vaina arterial y analícela en un dispositivo muestreador de sangre arterial para evaluar el pH, la presión parcial arterial de dióxido de carbono (PaCO2) y el oxígeno (PaO2, dependiendo de la FiO2 elegida), así como los niveles de hemoglobina, electrolitos, glucosa en sangre y lactato.
- Corregir los electrolitos y la glucosa en sangre, si es necesario, a los valores estándar mediante la infusión del producto necesario. Especialmente, considere la corrección de los niveles de potasio, ya que las alteraciones del potasio pueden aumentar el riesgo de arritogénesis desencadenada por la instrumentación.
- Si el cerdo estaba en ayunas antes del experimento, considere la infusión en bolo de solución salina isotónica (10 mL/kg infundidos durante 30-60 min) o un cristaloide similar para contrarrestar la hipovolemia.
- Considerar una infusión continua de 4 mL/kg/h de solución salina isotónica para contrarrestar la transpiración durante todo el protocolo.
NOTA: El experimento se puede pausar en este paso.
2. Cateterismo cardíaco derecho
- Enjuague un catéter Swan Ganz con solución salina y asegúrese de que el globo se esté inflando correctamente.
- Conecte los puertos del catéter Swan Ganz a los transductores de presión. Restablezca la presión a la presión atmosférica manteniendo los dos puertos de presión (para la presión arterial pulmonar y la presión venosa central, respectivamente) a nivel axilar medio del cerdo.
- Inserte el catéter Swan Ganz a través de la vaina 8F en la vena yugular derecha.
PRECAUCIÓN: Se deben usar delantales de plomo o protección similar siempre que se use fluoroscopia.
- Observe en la fluoroscopia cuando la parte distal del catéter de Swan Ganz está fuera de la vaina. Infle el globo con la jeringa asociada.
NOTA: El inflado del globo Swan Ganz dentro de la funda dañará el globo. La vista antero-posterior de la fluoroscopia es suficiente para todos los procedimientos descritos.
- Avance lentamente el catéter Swan Ganz siguiendo sus movimientos en la fluoroscopia. Los avances más lentos permitirán que el flujo sanguíneo guíe el catéter.
- Observar cambios en la señal de presión del puerto distal a medida que ingresa al VD y poco después de la arteria pulmonar (Figura 2). Asegúrese de que el catéter avance sin ninguna resistencia.
- Asegúrese de que la presión cambie de 5-8 mmHg en la circulación venosa central a 20-30 mmHg en sístole y 0-5 mmHg en diástole en el VD. Después de pasar las válvulas pulmonares, la presión diastólica será de 10-15 mmHg (ver Figura 2 para cambios en las formas de la señal de presión)
NOTA: Las presiones sistólicas en el VD y en la arteria pulmonar por encima de 40 (o una presión arterial pulmonar media por encima de 25) pueden ser un signo de hipertensión pulmonar debido a una infección neumónica en el animal. Recuerde que la ventilación mecánica con presión positiva también puede aumentar la presión arterial pulmonar.
- Desinfle el balón y asegúrese de que el puerto de presión distal aún esté en la arteria pulmonar principal. Utilice tanto la fluoroscopia como la señal de presión para esta verificación.