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Artículo de método

Modelo de Córnea Porcina Ex vivo de Queratitis Bacteriana: Una Técnica para Establecer la Infección Bacteriana en las Células Epiteliales de la Córnea

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8 de julio de 2025

En este artículo

Resumen

Fuente: Okurowska, K., et al. Establecimiento de un modelo de córnea ex vivo porcino para estudiar tratamientos farmacológicos contra la queratitis bacteriana. J. Vis. Exp (2020).

Este video describe un protocolo para configurar un modelo ex vivo para la queratitis bacteriana utilizando un botón corneoescleral diseccionado del ojo porcino. Las bacterias inoculadas atraviesan las incisiones epiteliales de la córnea para invadir el estroma subyacente y establecer una infección dentro de los tejidos corneales que imita la infección in vivo.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE

1. Preparación de un inóculo

  1. Vierta 10 mL de caldo LB en un matraz cónico de 50 mL con tapón de espuma.
  2. Transfiera una colonia de P. aeruginosa cepa PAO1 o cepa PA14 de una placa de agar fresca e incube a 37 °C durante 3-4 h hasta que las bacterias estén en la fase media de logaritmo.
  3. Transfiera el cultivo de bacterias a un tubo de 50 mL y centrifugue a 3.000 x g durante 5 min. Retire el sobrenadante y vuelva a suspend....

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Divulgaciones

No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tubo Falcon de 50 mLSls352070
Anfotericina BsigmaA2942
Placa Cellstar de 12 pocillosGreiner Bio-One665180
dextranosigma31425-100mg-F
DistelFisher Científico12899357
DMEM + glutamaxSlsD0819
Incubadora de doble hornoSlsOVe1020Horno esterilizador
Factor de crecimiento epidérmicoSlsE5036-200UG
JAMÓN F12sigmaN4888
Suero fetal de terneroLabtech InternacionalCA-115/500
fórcepsFisher Científico15307805
Heracell VIOS 160iTermo Científico15373212Incubadora de cultivo de tejidos
Insulina recombinante humanaSls91077C-1G
Agar LBsigmaL2897
MultitronInforsNo aplicableIncubadora bacteriana
PbsSlsP4417
Penicilina-EstreptomicinaSlsP0781
placa de PetriFisher Científico12664785
Placa de Petri 35x10mm CytoOneLaboratorio estelarCC7672-3340
Povidona yodadaFarmacia Weldricks2122828
Seguro 2020Fisher Científico1284804Cabina de seguridad microbiológica de clase II
Hoja de bisturí número 15Fisher CientíficoO305
Bisturí Swann MortonFisher Científico11849002

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