Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
El estudio se realizó en seis cerdos machos y hembras de tres meses de edad (Landrace Alemán) con un peso aproximado de 40 kg. Los animales fueron llevados a las instalaciones de cuidado animal al menos 7 días antes de los experimentos y fueron alojados de acuerdo con las recomendaciones de bienestar animal. A los animales se les proporcionó comida y agua ad libitum, y su estado de salud fue evaluado periódicamente por el veterinario responsable. Se mantuvo un tiempo de ayuno de 12 h antes de los experimentos. Todo el procedimiento experimental y el manejo de los animales fue supervisado por el veterinario responsable.
1. Inducción de la anestesia y mantenimiento de la anestesia
- Para la inducción de la anestesia y el mantenimiento de la anestesia, premedicar a los animales y sedarlos profundamente mediante una inyección intramuscular seguida de inyecciones intravenosas, si es necesario, para realizar la intubación endotraqueal. A partir de entonces, induzca y mantenga la anestesia mediante el uso de una combinación de un agente anestésico volátil con una aplicación continua de opioides complementada con una inyección adicional de bolo de opioides.
- Realizar inyecciones intramusculares de ketamina 20 mg·kg-1, azaperona 4 mg·kg-1 y midazolam 0,1 mg·kg-1 para premedicación y sedación.
2. Colocación de la sonda
- Coloque al animal en la posición lateral correcta y flexione la espalda del animal para ampliar el espacio entre las vértebras.
- Para la colocación percutánea de drenaje de líquido cefalorraquídeo para medir y controlar la presión cefalorraquídea, identifique el nivel de L 4/5 o L 5/6, punción de la piel y el espacio subcutáneo con la aguja introductora y retire la aguja de incrustación.
- Coloque una jeringa llena de solución salina en la aguja e introduzca cuidadosamente la aguja con presión constante sobre la jeringa llena de líquido.
- Una vez que se sienta una pérdida de resistencia como evidencia de la posición epidural, vuelva a introducir la aguja de incrustación e introduzca la aguja 2-3 mm más para perforar la duramadre y retirar la aguja de incrustación.
- Verifique la posición intratecal mediante un goteo rápido de licor claro. Introduzca el drenaje hasta 20 cm de profundidad, conecte el adaptador Luer-lock y verifique la posición mediante una aspiración cuidadosa de licor.
- Fije cuidadosamente el drenaje con suturas y conéctelo al sistema de drenaje del líquido cefalorraquídeo.
