Eliminación de la membrana nictitante: un procedimiento quirúrgico para extirpar la membrana nictitante del ojo de conejo

Resumen

Fuente: Honkanen, R. A., et al. Establecimiento de un modelo de ojo seco severo utilizando dacrioadenectomía completa en conejos. J. Vis. Exp. (2020).

En este video, demostramos un procedimiento quirúrgico para eliminar la membrana nictitante del ojo de conejo.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Eliminación de la membrana nictitante

NOTA: Para simplificar, la técnica para el ojo derecho se describe a continuación. Complete este procedimiento en el ojo izquierdo de la misma manera. Retire la membrana nictitante bilateralmente durante el período de aclimatación (generalmente la primera semana).

1. Coloque al conejo en una bolsa de sujeción del tamaño adecuado.
2. Administrar una inyección subcutánea de acepromazina (1 mg/kg) sobre los hombros con una jeringa de 1 cc y una aguja de 26 g para sedar al conejo. El punto final de esta sedación leve es cuando el animal mantiene una posición relajada de la cabeza sin movimientos normales de exploración y sus orejas ya no están completamente erguidas.
3. Con una micropipeta, aplique 25 μL de lidocaína (1%) sin conservantes en el ojo. Inserte un espéculo de alambre entre los párpados.
4. Agarre la membrana nictitante por su ápice con pinzas de 0,3 (o equivalente) y tire de ella sobre la superficie de la córnea. Inyectar lidocaína al 1% con epinefrina 1:100.000 en el espacio subconjuntival de la membrana nictitante utilizando una aguja de 26 G. Inyecte aproximadamente 0,3 mL para formar una ampolla de tamaño modesto sobre la membrana nictitante. Los volúmenes de inyección superiores a 1 mL se encuentran dentro de un rango de dosis seguro para conejos (2-4 mg/kg).
5. Retira el espéculo de alambre. Espere aproximadamente 5 minutos para que la lidocaína y la epinefrina hagan efecto. Durante este tiempo, realice el mismo procedimiento en el otro ojo.
6. Vuelva a colocar el espéculo de la tapa de alambre. Agarre y extienda la membrana nictitante sobre la superficie corneal con pinzas de 0,3. Corte la membrana en su base con tijeras de tenotomía o equivalente.
   nota: El sangrado suele ser mínimo, pero mantenga cerca una unidad de cauterización con batería de alta temperatura y úsela según sea necesario para minimizar el sangrado. También se puede usar presión directa sobre la base cortada de la membrana nictitante para detener el sangrado pequeño si ocurre.
7. Retire el espéculo de la tapa de alambre. Coloque un ungüento antibiótico tópico (neomicina, polimixina, bacitracina e hidrocortisona) sobre la superficie de la córnea.
8. Realice un procedimiento idéntico al del otro ojo según lo indicado por el protocolo.
9. Vuelva a colocar a los animales en jaulas individuales y déjelos curar durante al menos una semana, o hasta que la superficie conjuntival se haya curado completamente desde el punto de vista clínico, antes de realizar cualquier otro ensayo o intervención><. nota: La curación clínica completa está indicada por la ausencia de cualquier inflamación, inyección o secreción de las superficies conjuntivales. Los animales deben mantener los ojos abiertos normalmente, sin la presencia de ptosis protectora.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
acepromazina, Aceproinj	Henry Schein Salud Animal, Dublín, OH	NDC11695-0079-8	0,1 ml/kg inyección subcutánea para la sedación en conejos
bolsa de sujeción para animales	Henry Schein Salud Animal, Dublín, OH	Jorvet J0170	Use una bolsa del tamaño adecuado.
unidad de cauterización, de alta temperatura, alimentada por batería	Medline Industries Inc, Northfield, IL	REF ESCT001	Mantener a mano en caso de sangrado, protocolo 2.7
pinzas, 0,3	Bausch y Lomb (Storz), Bridgewater, Nueva Jersey	ET6319	Para la eliminación de la membrana nictante, protocolo 2.5
espéculo de tapa, de alambre	Bausch y Lomb (Storz), Bridgewater, Nueva Jersey	Barraquer SUH01	Para la eliminación de la membrana nictante, protocolo 2.4
lidocaína al 2% con epinefrina 1:100.000; mezcla 50:50	Hospira Inc, Lake Forest IL	NDC 0409-3182-02	Tratamiento previo antes de la eliminación de las membranas nictantes, protocolo 2.4
lidocaína, sin conservantes	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	L5647	1% en PBS para agente anestésico, para aplicación en el ojo, protocolo 2.4
micropipeta	Eppendorf	Research Plus 100 uL	Para la aplicación de lidocaína sin conservantes en el ojo, protocolo 2.4
Puntas de micropipeta	Productos médicos en todo el mundo	41071052	Para la aplicación de lidocaína sin conservantes en el ojo, protocolo 2.4
aguja, calibre 26	BD, Franklin Lakes, Nueva Jersey	REF 305115	Para inyección de lidocaína/epinefrina, protocolo 2.3 y 2.5
conejo, blanco de Nueva Zelanda	Laboratorios Charles River, Waltham, MA (Nueva Zelanda)	2-3 kg	Animales de investigación
tijeras, tenotomía Westcott	McKesson Médico-Quirúrgico, San Francisco, CA	Miltex 18-1480	Para la eliminación de la membrana nictante, protocolo 2.7
jeringa, 1 cc	BD, Franklin Lakes, Nueva Jersey	Ref 309659	Para inyección de lidocaína/epinefrina, protocolo 2.3 y 2.5