Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Preparación del modelo
- Aloje al cerdo macho adulto de 50 kg en un centro de cuidado de animales durante 1 semana antes de la cirugía para aclimatar al animal a las condiciones de alojamiento y a los cuidadores. Ayunar el modelo durante un mínimo de 6 horas antes del inicio de la anestesia.
- Anestesiar el modelo mediante una inyección intramuscular de ketamina (33 mg/kg), atropina (0,04 mg/kg) y buprenorfina (0,05 mg/kg), así como isoflurano inhalado (5%)9.
- Coloque el modelo en posición supina y rocíe las cuerdas vocales con lidocaína (1%) para prevenir el laringoespasmo. Realizar la intubación endotraqueal directa utilizando un tubo endotraqueal con manguito de 6,5 Fr. Confirmar la posición correcta del tubo endotraqueal mediante capnografía.
- Inserte una vía intravenosa de 18 G en la vena marginal del oído y comience una infusión de lactato de Ringer a una velocidad de 200 mL/h. Aplique un ungüento suave en los ojos del modelo para evitar la sequedad mientras está bajo anestesia general.
- Controle la frecuencia cardíaca y la saturación de oxígeno del modelo con un oxímetro de pulso aplicado a la cola del modelo. Ventile el modelo entre 14 - 16 respiraciones/min utilizando un ventilador mecánico y un volumen corriente de 5 - 10 mL/kg. Mantener una anestesia adecuada apuntando a una concentración alveolar mínima (MAC) de isoflurano entre 2 y 2,5.
- Antes del inicio de la cirugía, confirme la profundidad adecuada de la anestesia evaluando los reflejos de dolor con un pellizco en la pata trasera. Reevalúe los reflejos del dolor a intervalos regulares durante toda la cirugía.
2. Preparación del dispositivo
- Prepare la radiofrecuencia salina/bipolar encendida (SBRF; Figura 1) según las especificaciones del fabricante.
- Abra la pieza de mano (punta de sellado bipolar 6.0) y conéctela al generador.
- Establezca el ajuste de caudal salino en Bajo. Utilice solución salina al 0,9% para una conducción de energía máxima.
- Establezca el ajuste de potencia de radiofrecuencia en 160 W.
3. Cirugía: Laparotomía
- Realice una incisión de laparotomía de línea media larga y abierta con un bisturí # 10 que se extienda desde el xiphisternum hasta el pubis y pase a través de todas las capas de la pared abdominal.
- Establecer una exposición adecuada de los órganos sólidos de interés (p. ej., hígado, bazo, riñón), movilizar otras estructuras e insertar un retractor según sea necesario.
nota: Para simplificar, se hará referencia al hígado como el órgano sólido de interés durante el resto de este protocolo. Este protocolo también incluirá la creación de lesiones de grado similar dentro del riñón y el bazo.
4. Cirugía: Lesión Simulada de Órgano Sólido
NOTA: Las lesiones descritas a continuación representan un empeoramiento de la jerarquía de lesiones. Las lesiones son creadas por un cirujano traumatólogo experto y la hemostasia será obtenida por otro cirujano.
- Con una hoja de bisturí # 10, aplique una fuerza abrasiva (hacia adelante y hacia atrás) a la cápsula hepática para inducir el sangrado capsular. La lesión debe ser superficial (es decir, de 1 a 2 mm) y de 2 cm2 de tamaño. El tamaño de la lesión se puede aumentar en incrementos de 1 cm2 a discreción del operador.
- Crear laceraciones de órganos sólidos de gravedad creciente mediante la aplicación directa de un bisturí. La longitud de la laceración puede extenderse desde 5 cm hasta toda la longitud del órgano. La profundidad de la laceración debe ser de 1 cm y luego aumentarse en incrementos de 1 cm a discreción del operador.
- Cree lesiones penetrantes con un dispositivo contundente, como una pinza Kelly, con un movimiento de apuñalamiento. Estos pueden ser de un grosor parcial (es decir, el 50% del órgano) o de espesor completo (es decir, que atraviesan completamente el órgano).
5. Hemostasia
- Presione el botón de la pieza de mano, iniciando el flujo simultáneo de solución salina y la entrega de energía de radiofrecuencia bipolar. La solución salina hervirá en el lugar de aplicación.
- Aplique la punta del dispositivo directamente sobre la superficie cruda del hígado, en las áreas superficiales de sangrado o dentro de los defectos en el hígado mismo. No apuñale el órgano con el efector final.
- Aplique succión simultánea de una ventosa quirúrgica estándar según sea necesario para administrar la solución salina calentada y la energía directamente a las áreas de hemorragia en curso. Esto también ayuda a visualizar la ubicación precisa de la hemorragia en curso.
- Calentar los tejidos a aproximadamente 100 °C (coagulación térmica sin carbonización significativa) con un suave movimiento de ida y vuelta. Un "estallido" auditivo ocurrirá después de 3 a 5 segundos y significa que la quemadura se ha completado. A continuación, el usuario puede mover el instrumento de forma organizada al siguiente sitio de destino.
- Si es necesario, aplique electrocauterio de alto voltaje dirigido con precisión junto con la aplicación del SBRF y los dispositivos de succión para obtener la hemostasia. Esto puede ser necesario para la hemorragia más grande y vigorosa.
6. Sellado de conductos biliares pequeños y medianos
- Usando el mismo método descrito anteriormente, aplique la punta del instrumento a través del borde cortado/lesionado del parénquima hepático para sellar los conductos biliares pequeños a medianos.
