Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Implantación de tumores hepáticos mediante laparotomía
- Prepare al conejo receptor para la laparotomía. Anestesiar al conejo receptor con 45 mg/kg de ketamina y 5 mg/kg de xilacina para la inducción, seguida de intubación y mantenimiento con isoflurano al 1%-3% según sea necesario. Cuando el conejo esté anestesiado, afeita el sitio quirúrgico con un cortapelos. Limpie el área de la incisión con un lavado por triplicado con exfoliante de betadine, solución de etanol al 70% y solución de betadine, y cubra el abdomen de manera quirúrgica estéril.
- Con una cuchilla # 15, inicie la laparotomía haciendo una pequeña incisión vertical hacia abajo en la línea media a través de la piel del conejo a partir del proceso xifoides. Esto debe palparse fácilmente y tiende a ser aproximadamente del tamaño de un centavo estadounidense. Véase la figura 1.
- Refleja la piel e identifica la línea alba. Debe ser una banda blanca reflectante de tejido que viaja hacia abajo en la línea media. Utilice la disección roma para atravesar la línea alba y exponer el peritoneo. Véase la figura 2.
nota: El peritoneo se identifica fácilmente><, ya que estará directamente sobre el intestino, que se puede ver moviéndose con la respiración.
cautela: El peritoneo tiende a ser adherido al intestino subyacente debido a la tensión superficial. El uso de un traumatismo cerrado para diseccionar la línea alba ayuda a disipar el riesgo de perforar el intestino subyacente.
- Una vez que el peritoneo esté expuesto, diseccione cuidadosamente a través de él para ingresar a la cavidad peritoneal. Ahora se puede identificar el hígado. Para navegar mejor por el espacio abdominal, extienda la incisión de la línea media de 1 a 22 cm hacia abajo a través de la piel, el músculo y el peritoneo.
nota: La extensión de la incisión de la línea media se puede realizar de manera fácil y segura insertando cuidadosamente un hemostático curvo en el espacio peritoneal con la punta curva orientada superficialmente hacia el peritoneo. A continuación, abra ligeramente el hemostático y utilice una cuchilla para cortar el tejido entre los dos brazos del hemostático.
- Identificar el lóbulo izquierdo del hígado con el fin de seleccionar un sitio para la implantación del tumor. El lóbulo izquierdo es infero-lateral al lóbulo medial que se encuentra en la línea media.
- Antes de intentar extraer el hígado del espacio peritoneal, coloque un trozo de gasa seca en la cara inferior de la incisión><.
nota: La gasa proporcionará una superficie adherente para colocar el hígado y evitar que se retraiga hacia el abdomen.
- Usando pinzas atraumáticas o un pedazo de gasa húmeda sobre los dedos, extraiga cuidadosamente el lóbulo izquierdo del hígado del abdomen a través de la incisión y colóquelo sobre la gasa seca colocada anteriormente. Véase la figura 3.
cautela: La cápsula hepática es sensible y puede romperse fácilmente. Es fundamental ser cuidadoso al manipular este órgano para evitar hemorragias capsulares, hematomas hepáticos y/o eventuales hemoperitoneos.
nota: Por lo general, el hígado se declarará visualmente al entrar en el espacio peritoneal; Sin embargo, si el estómago del conejo está distendido, el hígado puede ser empujado cranealmente fuera de la vista. Si este es el caso, levante suavemente la pared abdominal con una sonda roma. En este escenario, el hígado tiende a adherirse a la cara ventral del diafragma debido a la tensión superficial, por lo que separa cuidadosamente el hígado con una sonda roma y debe desprenderse. Luego, use fórceps atraumáticas para extraer el hígado.
- En este punto, prepare el tejido tumoral para la implantación y coloque un trozo de gasa húmeda sobre el hígado para protegerlo.
- Seleccione una pieza de tejido tumoral preprocesado de 1\u20122 mm 3 para implantarla en el hígado. Véase la figura 4.
- Con una cuchilla # 11, perfore el tejido hepático en un ángulo de 45 ° haciendo una bolsa de 0,5 cm de profundidad, teniendo cuidado de no penetrar en la cara dorsal de la cápsula hepática. Deje la cuchilla en su lugar después de hacer la perforación. Véase la figura 5.
- Levante suavemente la cuchilla en dirección ventral para crear un pequeño bolsillo en el lecho hepático. Tome la pieza del tumor con fórceps, coloque la pieza del tumor en este bolsillo y luego retire la cuchilla.
nota: La cuchilla se puede quitar antes de insertar la pieza tumoral, sin embargo, el hígado sangrará y esto puede oscurecer el sitio de la punción, lo que dificulta su identificación><.
cautela: Asegúrese de minimizar el contacto del tumor con cualquier otra estructura para evitar la propagación involuntaria del tumor. Esto también se puede evitar dejando a un lado cualquier herramienta utilizada para ayudar con la implantación posterior.
- En este punto, se coloca una pieza de agente hemostático, como espuma de gel, sobre la bolsa tumoral para promover la hemostasia y evitar la expulsión de la pieza tumoral.
- Devolver el hígado al abdomen, una vez confirmada la hemostasia.
- Cerrar la pared abdominal con sutura de polidioxanona 3-0 en aguja cónica con un punto continuo simple y cerrar la piel con suturas de poliglictina 910 4-0 en una aguja de corte con punto subcuticular continuo.
cautela: Al cerrar la pared abdominal, tenga cuidado de no dañar el epiplón u otras estructuras intestinales con un tiro de sutura.
