Un modelo experimental de isquemia periférica: un procedimiento para generar isquemia periférica mediante ligadura de arterias femorales en un conejo

Resumen

Fuente: Sligar, A. D., et al. Modelo preclínico de isquemia de las extremidades traseras en conejos diabéticos. J. Vis. Exp. (2019).

En este video, demostramos un procedimiento quirúrgico para inducir isquemia periférica a través de la ligadura de la arteria femoral en un conejo. Este método proporciona un modelo experimental eficaz para la investigación de las enfermedades vasculares periféricas.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Aislamiento de la arteria femoral

1. Anestesiar a un conejo de Nueva Zelanda (4-6 meses de edad) con diabetes preinducida e hiperlipidemia, utilizando 20-40 mg/kg de ketamina y 2 mg/kg de midazolam mediante inyección subcutánea. Administre al conejo un 1,5 % a un 3 % de isoflurano (normalmente al 2 %) durante la sedación inicial con una mascarilla.
2. Hacer una incisión longitudinal en la piel sobre la arteria femoral derecha con un bisturí (hoja #15). Asegúrese de que la incisión se extienda inferiormente desde el ligamento inguinal terminando en el área justo proximal a la rótula (aproximadamente 6 cm).
3. Use una disección roma con tijeras Metzenbaum curvas o un hemostático curvo para mosquitos para exponer la arteria femoral.
4. Use retractores Weitlaner para mantener la incisión abierta.
5. Añadir 0,5 mL de lidocaína al 1% localmente para reducir la irritación de los nervios y promover la vasodilatación.
6. Continuar la disección roma de los tejidos para liberar toda la longitud de la arteria femoral junto con todas las ramas de la arteria femoral, incluidas las arterias epigástrica inferior, femoral profunda, circunfleja lateral y epigástrica superficial (Figura 1A).
7. Diseccionar más a lo largo de las arterias poplítea y safena, así como la arteria ilíaca externa (Figura 1A). Humedezca periódicamente el área con solución salina para protegerla del daño tisular. Si la disección roma se realiza a lo largo del surco femoral (entre los músculos) no es necesario cortar el músculo.
8. Separe cuidadosamente la arteria de la vena y el nervio como se muestra en la Figura 1B, C. Limatar las arterias indicadas por el diagrama con suturas de seda 4.0 colocando dos lazos con suficiente espacio entre ellos para cortar la arteria. Estos lazos se realizan con un nudo de cirujano seguido de cuatro nudos cuadrados.
9. Corta entre los dos lazos de las arterias ligadas con las tijeras pequeñas de Metzenbaum. Extirpar la arteria femoral desde su origen proximal como rama de la arteria ilíaca externa hasta el punto distalmente donde se bifurca para formar las arterias safena y poplítea.

Resultados

Figura 1: Inducción de isquemia de las extremidades traseras en conejos mediante ligadura y extirpación de la arteria femoral. (A) Ilustración de la anatomía vascular de la extremidad trasera del conejo. Colocar lazos en todos los puntos marcados para ligar las arterias. (B) Campo quirúrgico que muestra el corte hasta la arteria femoral antes de la ligadura. (C) Arterias femorales con ligaduras para ...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
0.9% Cloruro de sodio	Henry Schein Medical	1537468 / 1531434	Bolsa de 250 mL / 1000 mL de irrigación btl
Jeringa de 10 ml	VWR	BD309695
Aguja 27G	VWR	89219-288
Acepromazina	Patterson Veterinaria	VEDC207
Alfaxalona	Patterson Veterinaria	07-891-6051
Buprenorfina SR	ZooPharm
Cortapelos	amazona	B000CQZI3Q	Hoja Oster #40
Almohadilla térmica	Subcero de Cincinnati	Artículo 273
Bomba de almohadilla térmica	Gaymar		Gaymar T/Bomba
Hemostático	Herramientas de Bellas Ciencias	13009-12	Hemostático curvo para mosquitos
Isoflurano	Henry Schein Medical	1100734
ketamina	Patterson Veterinaria	856440301
lidocaína	McKesson Médico-Quirúrgico	239936
Crema de lidocaína/prilocaína	McKesson Médico-Quirúrgico	761240
Tijeras Metzenbaum	Herramientas de Bellas Ciencias	14019-13
Midazolam	Henry Schein Medical	1215470
escalpelo	Herramientas de Bellas Ciencias	10003-12
Hoja de bisturí	Herramientas de Bellas Ciencias	10015-00	Hoja #15
Suturas de seda	Ethicon-Johnson & Johnson	A183H	4-0 Corbatas de seda 18"
Paños quirúrgicos	Gepco	8204S
Retractor Weitlaner	Herramientas de Bellas Ciencias	Año 17012-13