Tinción con safranina-O: un método para visualizar la integridad estructural y la celularidad del cartílago

Abstract

Fuente: Zhao, Y., et al. Establecimiento de un modelo inducido quirúrgicamente en ratones para investigar el papel protector de la progranulina en la osteoartritis. J. Vis. Exp. (2014).

En este video, demostramos un procedimiento de tinción para el cartílago usando safranina-naranja. Este método ayuda a visualizar el cartílago y detectar cualquier daño.

Protocol

1. Tinción de safranina O

1. Comience con los portaobjetos de vidrio que contienen secciones sagitales en serie que abarcan una región desde el centro del cóndilo lateral hasta el centro del cóndilo medial de un modelo de ratón sacrificado con el menisco medial desestabilizado.
2. A continuación, desparafinar los portaobjetos en oxileno e hidratarlos en un gradiente de etanol a agua destilada. A partir de entonces, los portaobjetos se tiñen a través de la solución de hematoxilina de hierro de Weigert, la solución de Fast Green (FCF) al 0,05%, la solución de ácido acético al 1% y la solución de safranina O al 0,1%. Monta las correderas con un medio resinoso.
3. Puntúe los portaobjetos teñidos con Safranina O en función de la pérdida de proteoglicano (color rojo) en el cartílago y el porcentaje de destrucción en la estructura del cartílago, realice un análisis estadístico para la puntuación histológica.