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Artículo de método

Tinción de violeta cristalino: una técnica para visualizar células cancerosas resistentes a los medicamentos mediante ensayos de formación de colonias

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8 de julio de 2025

En este artículo

Resumen

Fuente: Mohr, L. et al., Generación de modelos de células de cáncer de próstata de resistencia al agente antimitótico docetaxel. J. Vis. Exp. (2017)

En este video, demostramos un ensayo de viabilidad celular utilizando un procedimiento de tinción de cristal violeta para células cancerosas resistentes a medicamentos quimioterapéuticos.

Protocolo

>1. Caracterización funcional de la resistencia adquirida a docetaxel mediante el ensayo de formación de colonias

NOTA: En este protocolo, la quimiorresistencia se ha evaluado utilizando ensayos de formación de colonias. Los métodos alternativos utilizados para evaluar la viabilidad celular (es decir, los ensayos MTS) se pueden utilizar en función de las preferencias de los investigadores.

  1. Coloque 2.000 células (DU145 o 22Rv1, tanto parentales como resistentes al docetaxel) por pocillo en placas de 6 pocillos, utilizando 2 mL de medio por pocillo.
  2. A las 24 h, añadir concentraci....

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Resultados

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Figura 1: Caracterización funcional y fenotípica de los modelos celulares resistentes a Docetaxel. Ensayos representativos de formación de colonias de células parentales y resistentes a Docetaxel tratadas con las concentraciones indicadas de Docetaxel durante 72 h. El porcentaje de colonias por cada concentración de tratamiento se representa en el gráfico incluido. Los experimentos son triplicados y los datos representan la media ± .......

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Divulgaciones

No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Células DU145 ATCC HTB-81
Células 22Rv1 ATCC CRL-2505
Docetaxel Productos químicos de Selleck S1148 en DMSO (10mM)
Placas de cultivo de tejidos de 6 pocillos halcón 353046
RPMI 1640 Medio Gibco 11875093Suplementado con 10% de FBS y 1% de penicilina/estreptomicina
Base B Suero Fetal Bovino Géminis 900208
1X solución salina tamponada con fosfato (PBS) Corning 21-040-CM
Cristal Violeta Sigma-Aldrich C0775
Solución de formalina al 10% Sigma-Aldrich HT501128

Etiquetas

Ensayo de formaci n de coloniasEnsayo de viabilidad celularTratamiento con docetaxelLavado con PBSSolubilizaci n con etanolRecuento manual de coloniasFormaci n de colonias tumoralesRespuesta a la concentraci n de f rmacos