Tinción TTC de cortes de tejido cerebral de rata: un procedimiento de tinción para diferenciar el tejido viable y necrótico en cortes de tejido después de una lesión por isquemia-reperfusión

Resumen

Fuente: Liepinsh, E., et al. Preparación del corazón y el tejido cerebral de roedores para la macrofotografía digital después de la isquemia-reperfusión. J. Vis. Exp. (2022)

Este video describe el procedimiento de tinción de cloruro de 2,3,5-trifenil-2H-tetrazolio para visualizar cortes de tejido cerebral de rata y diferenciar el tejido viable y dañado después de la oclusión y reperfusión de la arteria cerebral media.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Tinción y corte de cerebro

1. Después del experimento de oclusión de la arteria cerebral media, extraiga el cerebro, incluido el tronco encefálico, del cráneo y lávelo con PBS helado.
2. Elija el tamaño correcto de la matriz de acero inoxidable del cerebro (consulte la Tabla de Materiales) en función del peso de los animales (Figura 1B). Coloque el cerebro con su lado ventral hacia arriba en la mat....

Resultados

Figura 1: Matrices para el corte del corazón y el cerebro de la rata. (A) Corazón de rata, (B) Cerebro de rata.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC)	Sigma-Aldrich	298-96-4
Matriz de corte de cerebro de rata adulta	Instrumentos Zivic	BSRAS001-1
Hojas de afeitar de un solo filo	Instrumentos Zivic	BLADE012.1
Cámara digital sin espejo Sony Alpha a6000	Sony	ILCE6000	Puede ser reconstruido por cualquier cámara digital actualizada
Cuchilla quirúrgica	Heinz Herenz, Hamburgo, Alemania	BS2982
Bandeja de pesaje, 70 mL	Sarsted	71,99,23,212
Agitador térmico	BioSan	PST-60HL-4
Pinzas de tejido dentado	Agnthos	11021-12
cloruro de sodio	Biorreactivos de Fisher	BP358-10
Pinzas para cubrevidrios, en ángulo	Herramientas de Bellas Ciencias	11073-10