Tinción de Sudán IV: Un procedimiento para teñir placas ateroscleróticas cargadas de lípidos en el arco aórtico de ratón extraído

Resumen

Fuente: Centa, M., et al. Cuantificación de la aterosclerosis en ratones. J. Vis. Exp. (2019)

Este video muestra un procedimiento que utiliza la tinción Sudán IV para teñir los depósitos de grasa en el arco aórtico del ratón extraído para visualizar las placas ateroscleróticas y determinar el alcance de la aterosclerosis.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE

>1. Análisis facial del arco aórtico y la arteria braquiocefálica

1. Prepare los lechos de alfiler para el análisis de la cara de los arcos aórticos. Doble un segmento de película de cera de parafina ocho veces para hacer una superficie plana de 25 mm x 25 mm. Envuélvelo con cinta aislante eléctrica negra para crear un fondo oscuro para la aorta. Coloque una etiqueta en la parte posterior de la cama de alfileres y use un lápiz de mina para esc....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Cinta aislante eléctrica negra (50 mm de ancho)	Cualquier minorista especializado		Para crear lechos de fijación para arcos aórticos.
Tijeras de disección (10 cm, rectas)	Instrumentos de precisión mundial	Año 14393	Para la disección general de órganos.
Pinza Dumont #5 (11 cm, recta)	Instrumentos de precisión mundial	500341	Para la microdisección de la aorta.
Etanol 70% (v/v)	Productos químicos de VWR	83801.29	Líquidos y vapores altamente inflamables, almacene en un lugar bien ventilado y manténgalo fresco.
Etanol absoluto ≥99,8%	Productos químicos de VWR	20821.31	Líquidos y vapores altamente inflamables, almacene en un lugar bien ventilado y manténgalo fresco.
Formaldehído 4% estabilizado, tamponado (pH 7,0)	Productos químicos de VWR	9713.1	Nocivo por inhalación, en contacto con la piel y si se ingiere.
Isopropanol	Merck	1096341011	Líquido inflamable, causa irritación ocular grave y puede causar somnolencia o mareos.
Portaagujas Micro Castroviejo (9 cm, recto)	Instrumentos de precisión mundial	503376	Para la fijación de arcos aórticos.
Clavijas para insectos, 0,10 mm	Herramientas de Bellas Ciencias	26002-10	Para la fijación de arcos aórticos.
Parafilm M	Bemis	PM992	Película de cera de parafina utilizada para crear lechos de alfiler para arcos aórticos.
Solución salina tamponada con fosfato (PBS)	-	-	Se requiere una solución estéril y libre de RNasa para la perfusión de ratones
Microscopio estereoscópico	Microsistemas Leica	MZ6	Para disección y documentación presencial
Sudán IV	Sigma-Aldrich	S4261	No clasificado como sustancia o mezcla peligrosa.
Tijera Vannas (8 cm, recta)	Instrumentos de precisión mundial	503378	Para la microdisección de la aorta.