Visualizarse los microorganismos del suelo mediante el contacto Deslice análisis y microscopia

1. suelo diapositiva microcosmos preparación

1. Recoger suelo de jardín de la superficie (0-6 "profundidad), y pesan 150 g suelo en dos tazas separadas.
   1. Si el suelo tiene alta densidad de la materia orgánica, peso 100 g.
2. Una taza de la etiqueta "tratamiento" y el otro "Control".
3. Calcular la cantidad de agua necesaria para modificar el contenido de humedad.
   1. Contenido de humedad está a menudo cerca de capacidad de campo.
      
4. Medir la cantidad de agua destilada con una probeta graduada.
5. Vierta la cantidad de agua destilada en dos viales.
6. Frasco de etiqueta un "Tratamiento" y el otro "Control".
7. Modificar el agua en el frasco de "Tratamiento" con suficiente glucosa a una concentración de glucosa final de suelo de 1%, según una base de peso seco en el suelo de "Tratamiento".
8. Agregar 200 mg NH₄NO₃ en el frasco de "Tratamiento" y revolver para disolver las enmiendas. El nitrato sirve como una fuente de nutrientes para los microbios del suelo.
9. No modificar el frasco de "Control".
10. En pequeñas alícuotas de 50 mg aproximadamente, mezcle el contenido del frasco de "Tratamiento" en la Copa de "Tratamiento". Revuelva con una espátula después de cada adición de la alícuota.
11. En pequeñas alícuotas, mezcle el contenido del frasco de "Control" en la Copa de "Control". Revuelva con una espátula después de cada adición de la alícuota.
12. Cuatro portaobjetos limpio de la etiqueta: dos toboganes de "Control" y dos "tratamiento".
13. Inserte las dos diapositivas de "Tratamiento" en la Copa "Tratamiento" del suelo e insertar las diapositivas de "Control" dos en la Copa del suelo "Control". Dejar 2 cm de cada diapositiva que proyecta sobre la superficie del suelo y asegúrese de dejar un espacio entre las dos diapositivas.
14. Cubrir las copas con el abrigo plástico y asegúrelo con una banda elástica.
15. Prefore la envoltura varias veces para permitir que el aire, pero todavía evitar la evaporación excesiva.
16. Registrar el peso de ambos vasos.
17. Incubar las tazas llenas de suelo a temperatura ambiente en una área designada/incubadora durante 7 días.

2. Deslice la coloración y la microscopia

1. Registrar el peso de ambos vasos.
2. Calcular la humedad del suelo en el momento de retiro de la diapositiva.
3. Retire las dos diapositivas de cada taza pulsando cada diapositiva a una posición inclinada y retirar para que no se disturbe la cara superior de la diapositiva.
4. Identifique y marque el lado de la diapositiva teñidas y observadas.
5. Golpee suavemente el portaobjetos sobre la mesa para eliminar las partículas de suciedad grandes.
6. Limpie con una toalla de papel húmeda la cara inferior de las diapositivas. Seque las diapositivas en temperatura ambiente.
7. Usar gafas protectoras y sosteniendo cada diapositiva con pinzas, sumerja los portaobjetos en ácido acético al 40% (v/v) 1-3 minutos bajo una campana de humos.
8. Lave el exceso de ácido bajo un chorro suave de agua.
9. Utilizando un gotero, cubrir la superficie de los portaobjetos con fenólico de rosa de Bengala. Apoyar la diapositiva sobre una rejilla de tinción sobre un recipiente para recoger el exceso mancha. Ten cuidado, no lave con la fuerza que puede eliminar los microorganismos de la superficie de los portaobjetos.
10. Diapositivas de 5-10 min no deje que la corredera se convierten en manchas secas. Añadir más colorante si es necesario.
11. Suavemente Lave los portaobjetos para eliminar el exceso de la mancha.
12. Deje que los portaobjetos se seca a temperatura ambiente.
13. El objetivo de inmersión de aceite, tenga en cuenta la diapositiva utilizando un microscopio (figura 1).

Figura 1. Una diapositiva bajo el microscopio.