Extracción Soxhlet de biomarcadores lípidos de sedimento

1. configuración y preparación de materiales

1. Recoge una muestra de sedimentos marinos congelados, liofilizados, triturada y homogeneizada. Una muestra como ésta contiene muchos de los compuestos necesarios para las normas.
   1. Las normas se hacen a menudo de los sedimentos que se dejan después de una expedición de perforación o de análisis. Por ejemplo, en este experimento, se extrae el sedimento que se obtiene de la 'parche de barro', ubicada al sur de Cape Cod. Este sedimento se toma como parte de una expedición de perforación pero no se utilizará para responder preguntas científicas. Por lo tanto, podemos usarlo para hacer un estándar.
   2. Coloque un trozo de ~ 100 g de sedimento en el congelador durante la noche se congela a través de.
   3. El sedimento está totalmente congelado, una vez en el congelamiento del secador (disponible de muchos minoristas de equipos científicos como Fisher) y espere hasta que el condensador alcanza el valor deseado (a menudo ~-30 ° C).
   4. Cargar la muestra de sedimento en la congelación de la secadora y cierre la purga para empezar a tirar de un vacío en la muestra.
   5. Dependiendo de la cantidad de agua en el sedimento y el tamaño de la muestra, puede tomar varios días para la muestra a secar.
   6. Una vez seca la muestra, apagar la congelación, secadora y retire la muestra.
   7. Colocar la muestra en un solvente mortero lavado y molido a un polvo con un mortero. Para ello toda muestra y conservar en un tarro de cristal en el congelador hasta que esté listo para extraer.
2. Dependiendo del tamaño de la muestra, utilizar los frascos con volúmenes que van de 4-60 mL. Para este experimento, utilizar frascos de vidrio de borosilicato (40 mL) y casquillos seguros solvente. Quema los frascos, pipetas de vidrio de borosilicato y pesaje latas a 550 ° C por 6 h antes de eliminar los posibles contaminantes orgánicos.
3. Obtener diclorometano y metanol (ambos son comunes en los laboratorios de geoquímica orgánicos más), utilizar individualmente para limpiar instrumentos de laboratorio y cristalería antes de usar. Una mezcla de diclorometano (DCM) en metanol (MeOH; 9:1) se utiliza en muchos laboratorios para extraer eficientemente biomarcadores con un amplio rango de polaridades. Disolventes deben estar libres de contaminantes orgánicos.
4. Adquirir un aparato de soxhlet a utilizar en este experimento (éstos pueden adquirirse de Fisher Scientific u otro minorista de ciencia), a continuación, lavado y combustión a 550 ° C por 6 h antes de su uso.
5. Obtener cartuchos de fibra de vidrio (pueden comprarse en Whatman) y combustión a 550 ° C por 6 h antes de su uso.

2. preparación de muestra

1. Coloque una combustión peso de lata en la escala de laboratorio y Tara.
2. Enjuague el espátula de laboratorio con solvente, luego utilizar para transferir una masa adecuada de muestra en la bandeja de pesaje y registrar la masa.
   1. La masa de la muestra varía en función de su contenido de materia orgánica. Materia orgánica relativamente magro material (barro marino) puede requerir varios gramos, mientras que el material rico de materia orgánica (tejido foliar) puede requerir mucho menos.
3. Transferir todo el material en la bandeja de pesaje en un dedal de fibra de vidrio quemado.

3. extracción

1. Transferencia de ~ 400 mL de la mezcla de DCM:MeOH (9:1) al matraz de fondo redondo (el frasco debe ser más de la mitad) y poner en el manto de calefacción. Añadir varias (5-10) aclarado solvente hirviendo fichas.
2. Colocar el dedal de la muestra, abierto, en la pieza central del aparato Soxhlet.
3. Coloque la pieza central en la parte superior del matraz de fondo redondo y asegúrelos con una abrazadera de cristalería.
4. Instale el condensador en la parte superior la pieza central de la Soxhlet y asegúrelos con una abrazadera de cristalería.
5. Coloque una de las líneas de agua frías del condensador a la tubería de agua fría en la campana mediante una abrazadera. La otra ruta hacia el drenaje.
6. Abra el agua para asegurar el drenaje y la circulación adecuada.
7. Encienda el manto de calefacción y regulación de la temperatura hasta que hierva ligeramente el solvente en el matraz de fondo redondo.
8. Controlar la extracción de un par de veces durante la siguiente hora.
   1. Compruebe que correctamente se ajusta a hervir baja la temperatura, el solvente es condensación en el condensador goteando en el pedazo de centro, el pedazo de centro es llenado y vaciado correctamente y el agua está drenando correctamente en el desagüe de la campana.
9. Controlar la extracción en lo próximo 36 h.
   1. Asegurar correctamente se ajusta la temperatura a ebullición bajo, el solvente es condensación en el condensador y goteando en el pedazo de centro, el pedazo de centro es llenado y vaciado correctamente, el agua está drenando correctamente en el desagüe de la campana y sigue siendo el nivel de disolvente en el matraz de fondo redondo completo alrededor de la mitad.
10. Después de 36 h, detener la extracción apagando el manto de calefacción.
11. Etiqueta el frasco "TLE".