Eliminación de compuestos ramificados y cíclicos por aducción de Urea para U^k'Paleothermometry₃₇

1. configuración y preparación de materiales

1. Obtener un total de lípidos extracto (TLE) utilizando un método de extracción por solvente (sonicación, Soxhlet o extracción acelerada de disolvente (ASE)).
2. Comprar los siguientes materiales a cualquier distribuidor de productos químico: combustión de borosilicato de vidrio pipetas y bulbos; agua pura; hexano; Diclorometano (DCM); metanol; de la urea.
   1. Los reactivos deben ser puro y libre de hidrocarburos. Alternativamente, el agua pura se puede hacer en un laboratorio utilizando un sistema de purificación de agua.
3. Obtener frascos de 4 mL del borosilicate con casquillos de PTFE.

2. métodos

1. Hacer una mezcla de DCM:Hexane de 2:1 (v: v).
   1. En un matraz de Erlenmeyer, mezclar 200 mL de DCM y 100 mL de hexano.
2. Hacer una mezcla de urea en metanol (100 mg/mL).
   1. Vierta 300 mL de metanol en un matraz Erlenmeyer.
   2. Añadir 300 mg de urea.
   3. Agite en una placa de agitación automática hasta que se disuelva completamente la urea.
3. Comenzar con la muestra seca en un vial de 4 mL.
4. Suspender la muestra en 1,5 mL de una mezcla 2:1 de DCM:Hexane (v: v).
   1. Si la muestra no se disuelve completamente, someter a ultrasonidos durante 5 minutos.
5. A esta mezcla, añadir 1,5 mL de urea en metanol.
   1. Después de esta adición, observe un precipitado blanco forma. Esto indica la creación de cristales de urea.
6. Secar suavemente los cristales bajo nitrógeno, con calor suave. Asegúrese de que todos solvente se ha evaporado antes de proceder al siguiente paso.
7. Enjuagar los cristales 3 x con aproximadamente 1 mL de hexano. Quitar el hexano entre cada enjuague con una pipeta de vidrio para transferir a un frasco etiquetado como "no-aducción."
8. Disolver los cristales en 2 mL de agua pura. Agitar para asegurar la disolución completa.
9. Extraer la fase acuosa con hexano por adición de 1 mL y agitándolo suavemente durante 5 s.
10. Permitir que el hexano y el agua a completamente separada antes de extraer aproximadamente el 75% del hexano con una pipeta de vidrio y transferir a un frasco con la etiqueta "aducción."
11. Repita el paso 2.10 dos veces.
12. Deseche la solución de urea y agua en un recipiente de residuos adecuado.