Question 1

¿Cuál es la estructura de un bacteriófago?

Accepted Answer

Los bacteriófagos son virus que consisten en un genoma de ácido nucleico, ya sea ADN o ARN, rodeado por una capa proteica llamada cápside. Algunos fagos tienen una envoltura lipídica adicional y apéndices de superficie en forma de espiga o colas. Estas partículas ultramicroscópicas son demasiado pequeñas para verlas con un microscopio óptico y solo pueden verse usando un microscopio electrónico.

Question 2

¿Cómo infectan y se reproducen los bacteriófagos en las células bacterianas?

Accepted Answer

Los bacteriófagos se adhieren a la superficie de la célula bacteriana e inyectan su material genético en el huésped. El genoma viral se replica y las proteínas de la cápside se producen utilizando la maquinaria bioquímica de la célula huésped. Una vez que las partículas del fago se ensamblan, se liberan al lisar la célula huésped, a menudo estallando y matando la bacteria en el proceso.

Question 3

¿Qué es un ensayo de placas y cómo mide la concentración de fagos?

Accepted Answer

Un ensayo de placa mezcla fagos con bacterias y agar blando cubierto sobre placas de agar regular. Las bacterias forman un césped continuo, y cuando los fagos infectan y lisan bacterias, se forman placas como zonas claras. Contar placas discretas y calcular las unidades formadoras de placa (UFC) por mililitro determina la concentración original de fagos en la muestra.

Question 4

¿Por qué son los colifagos indicadores útiles de contaminación del agua?

Accepted Answer

Los colifagos infectan E. coli, una bacteria intestinal común que indica contaminación fecal. Son indicadores sustitutos confiables de los enterovirus causantes de enfermedades que también se transmiten por vía fecal pero son difíciles de evaluar. Los métodos de enumeración rápidos y económicos hacen de los colifagos herramientas atractivas para evaluar la contaminación fecal en el medio ambiente muestras de agua.

Question 5

¿Qué condiciones son necesarias para preparar bacterias en un ensayo de placa?

Accepted Answer

Las bacterias deben estar en la fase logarítmica de crecimiento para asegurar que cada bacteria esté viva y permita que el fago produzca progenie. Tres horas antes del ensayo, inocule el cultivo de una noche en caldo fresco y incube a 35-37°C con agitación. Este tiempo asegura que las bacterias alcancen la actividad metabólica óptima para apoyar la replicación del fago.

Question 6

¿Cómo se pueden adaptar los ensayos de placa para detectar virus distintos de los bacteriófagos?

Accepted Answer

Los ensayos de placas pueden realizarse con virus de mamíferos como la influenza al cultivar células de mamíferos como monocapas en platos de cultivo de tejidos. Se agregan medios que contienen virus para permitir la infección, luego se recubren las células con medio inmovilizante como la agarosa. Después de una incubación que dura hasta dos semanas, las células infectadas se fijan y se tiñen para visualizar y contar las placas.

Question 7

¿Cómo se obtienen aislados individuales de fagos de muestras ambientales usando ensayos de placas?

Accepted Answer

Los fagos se recolectan de muestras ambientales como el suelo por filtración, luego se utilizan para infectar bacterias susceptibles en un ensayo de placa. Se seleccionan placas individuales y se extienden en nuevas placas de agar recubiertas con agar superior que contiene bacterias. La concentración de fagos disminuye a lo largo de la extensión, permitiendo que se aíslen y se analicen más a fondo las placas discretas de tipos de fagos individuales.

Detección de bacteriófagos en muestras ambientales - Cuestionario de evaluación