Electroforesis capilar (EC)

1. configuración de instrumentación CE

1. Encienda el instrumento de la CE y la computadora. Utilizando el software de la computadora, encienda la fuente de luz para el análisis de la UV permitir que se caliente. Algunos programas tienen un indicador cuando la lámpara está lista para usar (icono de la lámpara ilumina en color).
2. Hacer un archivo de métodos. Configure los parámetros importantes para el funcionamiento de la CE. En este análisis las temperaturas del almacenaje del cartucho y de la muestra son de 35 ° C. La longitud de onda para la detección de UV es 214 nm.
3. Escribir un programa de tiempo. El programa consiste en generalmente pasos de enjuague (para limpiar el capilar antes del análisis), pasos de la inyección y luego un paso de electroforesis. Para el paso de enjuague, realizar 2 enjuagues durante 1 minuto con 20 psi de presión. El primer enjuague es con NaOH, que ayuda a asegurarse de que los grupos silanol de la pared capilar son deprotonated. La segunda aclaración es con tampón de ejecución (aquí para el tampón de borato de 0,025 M) para asegurarse de que el tubo capilar es izquierda equilibrada con el tampón.
4. Para la inyección, inyección a presión se utiliza en 0,5 psi para 5 s.
5. Para el paso de la electroforesis, las condiciones son separación tensión: 20 kV, tiempo: 5 min, polaridad normal. Para cada paso, también indican que vial es la entrada y que vial es la salida. Guarde el archivo de métodos después de entraron todos los parámetros.

2. preparación de los estándares y las muestras de Soda

1. Hacer soluciones madre de 500 ppm de aspartamo, cafeína y ácido benzoico en agua. Tomar 50 mL de cada uno, utilizando un matraz aforado.
2. Hacer una solución estándar de aspartamo 150 ppm, 150 ppm cafeína y ácido benzoico de 100 ppm en un matraz aforado de 10 mL.
3. Hacer soluciones de cafeína estándar de 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm y 200 ppm en un matraces aforados de 10 mL.

3. ejecutar los ejemplos en la CE

1. Coloque los frascos que contienen estándares o muestras de soda en el soporte para el frasco de muestra. Asegúrese de anotar que la muestra está en que ranura. Dos ranuras tienen el borato ejecutar el buffer y la solución de enjuague de NaOH de 0.1 M.
2. En el fichero, la entrada ranura que es el primer frasco de la muestra.
3. Adquirir una única prueba, asegurándose de que toda la información de datos del programa de entrada las solicitudes.
4. Seguir para la adquisición de datos, cambiando el frasco de entrada para cada muestra. Ejecutar la norma de combinación, las 3 concentraciones de cafeína y una Pepsi y diet Pepsi muestra.
5. Inserte el blanco en el instrumento y elegir el instrumento adecuado.
6. Analizar los datos en el ordenador. Calcular las áreas de pico y superposición de normas y muestras reales para ayudar a identificar picos. Hacer una curva de calibración para los datos de la cafeína.