6.4: Trabajo con Centrífugas

1. protocolo general para el uso seguro de la centrífuga

1. el laboratorio supervisor o laboratorio oficial de seguridad debe velar por todos los usuarios están entrenados adecuadamente en la selección del rotor, tubo de la muestra y el funcionamiento adecuado de la centrifugadora de.
2. Cualquier nuevo usuario debe ser supervisado de cerca por un usuario entrenado hasta que está seguro de cómo usar correctamente el instrumento.
3. Antes de utilizar el instrumento, cada usuario debe leer y comprender las instrucciones de seguridad para la centrifugadora específica.
4. Dependiendo de la muestra, se deben utilizar rotores compatibles.
5. El rotor, el tubo y el eje deben ser limpia, seca y libre de grietas o deformidades.
6. Los O-rings deben comprobarse cualquier desgaste o grietas de.
7. Es importante asegurarse de que los tubos utilizados para la centrifugación son compatibles con la muestra y la velocidad de rotación (baja, alta o ultra).
8. Los tubos de la centrífuga no deben llenarse más de tres cuartas partes de su nivel máximo.
9. Los tubos deben estar cerrados herméticamente.
10. Es extremadamente importante balancear los tubos frente a la unos a otros. No hacerlo así puede llevar a la separación incompleta y, en casos extremos, puede causar la dispersión de los contenidos del tubo en la cubierta de la centrífuga.
11. Antes de encender la centrífuga, el rotor debe medirse para garantizar que se asiente correctamente en el disco y la tapa está bien cerrada.
12. La tapa debe mantenerse cerrada en todo momento cuando la centrífuga está en funcionamiento y nunca debe ser abierta hasta que el rotor se detiene completamente.
13. El operador debe permanecer en las proximidades de la centrifugadora hasta que ha llegado con seguridad a la velocidad de operación de destino. En el caso de sonidos extraños o vibraciones, el instrumento deberá ser inmediatamente apagado. Nunca se deben exceder el límite de velocidad del instrumento. Al apagar, permitir tiempo suficiente para que el rotor reducir la velocidad a la posición parada. Centrifugadoras modernas tienen indicadores que se suponen que es seguro abrir la centrífuga que.
14. Una vez que la centrifugación es sobre, las muestras deben ser removidas y el instrumento debe revisarse cualquier vertido o derrame accidental. Si es necesario, el rotor debe limpiarse muy bien.

2. Precauciones y manejo de productos químicos peligrosos o materiales infecciosos

1. al usar productos químicos peligrosos o muestras biológicas que podrían ser infecciosas, es importante que el instrumento mientras está en uso para alertar a otros trabajadores para la etiqueta del peligro.
2. Guantes adecuados ¹ se deben usar para manejar muestras peligrosas.
3. Sellado tubos de seguridad deben ser utilizados. Es preferible utilizar confinamiento secundario, si está disponible, para los tubos de la centrífuga. Éstos son generalmente en forma de inserciones de plástico o vidrio que se colocan directamente en las cubetas de la muestra de la centrifugadora.
4. Una vez terminada la centrifugación, los tubos se extrae el rotor y se abre sólo en lo humos campana o biológico gabinete de seguridad, según sea el caso.
5. Limpieza, si es necesario, debe hacerse con extremo cuidado, para no exponer al operador de productos químicos peligrosos o materiales infecciosos. En caso de derrames de tales muestras, consulte el paso 3, situaciones de emergencia, por debajo de.
6. Para tipos específicos de muestras peligrosas, puede ser preferible mantener procedimientos estándar y protocolos de limpieza en laboratorio. Estos deben ser revisados y actualizados por consiguiente, es necesario.

3. Situaciones de emergencia y sus medidas de seguridad

una situación de emergencia puede surgir si el rotor funciona mal o si hay un derrame en la centrífuga debido a la rotura del tubo o por mal manejo. En tales situaciones, deben seguirse los pasos siguientes.

1. La centrífuga debe ser apagada inmediatamente y la tapa debe mantenerse cerrada hasta que otros notifican y evacuación el lugar. El poder debe ser terminado en el botón de encendido del instrumento. El botón estará ubicado en el frente, lado o detrás del instrumento. El usuario debe familiarizarse con su localización. Si el botón de encendido está fallando, entonces el usuario debe quitar el enchufe de alimentación principal de la toma.
2. Para reducir el riesgo de aerosoles, a veces es mejor dejar la centrifugadora intacta de al menos 0,5 h. Consulte el documento técnico de centrífuga.
3. Para limpieza de derrames, el operador debe estar bien familiarizado con la muestra y debería usar una vestimenta apropiada como bata, guantes, protector facial y gafas de seguridad.
   1. Una vez limpia, el material derramado debe eliminarse adecuadamente y la ropa de protección contaminada debe desecharse o limpiada correctamente. Manos y piel expuesta se deben lavar muy bien.
4. Si abiertamente expuesto a materiales altamente peligrosos, se debe llamar 911 o atención médica inmediata debe ser administrada a la persona afectada.

4. mantenimiento de la centrifugadora

Nota: el cuerpo de la centrifugadora se hace generalmente de metales que pueden corroer en presencia de humedad, productos químicos o detergentes fuertes. Para el mantenimiento apropiado de la centrífuga, se recomienda seguir cuidadosamente el fabricante ' instrucciones para la limpieza y mantenimiento. Aparte de eso, algunas medidas generales de mantenimiento a tener en cuenta son los siguientes.

1. La centrifugadora debe estar siempre limpios y secos.
2. Cualquier tipo de derrames debe limpiarse inmediatamente.
3. El rotor debe ser descontaminado después de su uso con materiales biológicos y radioactivos. Se recomienda utilizar 10% de lejía durante 30 minutos seguido de etanol al 70%, dejando el aire de rotor seco.
4. Cepillo abrasivo cables nunca deben utilizarse para limpiar el rotor y asociados piezas.
5. El rotor debe ser inspeccionado después de cada uso por el operador y por lo menos anualmente por el inspector fabricante.
6. A libro de registro debe mantenerse para que cada centrífuga mantener un registro de usuarios, muestras y servicio de la historia. Además, se pueden incluir copias de cualquier material relacionado con la garantía en este cuaderno.

La centrifugación es una de las herramientas más poderosas utilizadas en los laboratorios para la separación de mezclas heterogéneas, pero puede ser peligrosa y, por lo tanto, se deben aplicar precauciones de seguridad.

Una centrífuga hace girar rápidamente las muestras para separar materiales heterogéneos, lo que induce fuerzas centrífugas extremas en las muestras y en el instrumento. Debido a la alta velocidad a la que opera una centrífuga, puede causar lesiones graves al usuario si se maneja incorrectamente. Por lo tanto, se debe tener especial cuidado al usar una centrífuga para evitar derrames y daños al equipo.

Este video ilustrará el mecanismo de una centrífuga y cómo operar y mantener una de manera segura.

Antes de entrar en los detalles de las medidas de seguridad, repasemos rápidamente los conceptos básicos de la centrifugación. Las centrífugas contienen un rotor alojado en un husillo. Por lo general, se pueden instalar rotores de diferentes tamaños en un solo husillo para acomodar diferentes botellas de muestra, tubos o bolsas. Un motor hace girar el rotor a unas RPM o revoluciones por minuto especificadas. Esto, a su vez, imparte la fuerza centrífuga sobre la mezcla heterogénea dirigida lejos del eje de rotación, lo que separa las partículas con diferentes densidades.

Los diferentes tipos de centrífugas funcionan a diferentes RPM: las centrífugas de baja velocidad funcionan a menos de 10,000 RPM, las de alta velocidad hasta 21,000 y las ultracentrífugas hasta 30,000 y más. Cada tipo tiene diferentes rotores que son compatibles con él. Después de la carrera, un sistema de frenado generalmente reduce la velocidad del rotor. En cualquier centrífuga, la alta velocidad deforma el rotor.

En uso normal, volverá a su tamaño anterior. Sin embargo, si la fuerza debida al giro excede la fuerza máxima que el rotor puede manejar, entonces podría deformarse permanentemente. Esto puede provocar grietas, que a su vez pueden provocar fallos graves. Las fallas de la centrífuga, por otro lado, pueden provocar fugas de muestras, lo que puede ser peligroso si se trata de materiales peligrosos y debe manipularse con cuidado. Ahora, le mostraremos cómo preparar muestras y usarlas de manera segura en la centrífuga.

En primer lugar, seleccione los tubos de centrífuga adecuados que sean compatibles con las velocidades de rotación que desea utilizar. Consulta la documentación para conocer los límites del tubo. Los tubos deben estar intactos y libres de grietas. Llene cada uno a no más de 3/4 de su capacidad para evitar derrames. A continuación, asegúrese de que los tubos estén equilibrados y tápalos herméticamente.

Al centrifugar muestras químicas o biológicas peligrosas, tome precauciones especiales. Use el equipo de protección adecuado y prepare las muestras en un entorno de trabajo adecuado, como una campana extractora o una cabina de flujo laminar. Para obtener más información sobre estas características de seguridad, consulte los videos de JoVE sobre las campanas extractoras.

Si es necesario, use una contención secundaria para materiales peligrosos, como un inserto de vidrio o plástico. También se pueden utilizar tubos de seguridad sellados que proporcionan un entorno contenido. Todos deben estar capacitados antes de usar cualquier centrífuga o rotor.

Seleccione un rotor apropiado para la centrífuga. Compruebe que el rotor y su tapa estén limpios y secos y no tengan grietas ni deformidades. Asegúrese de que las juntas tóricas del rotor o la cubierta no estén desgastadas. Además, revise el husillo de la centrífuga para ver si está doblado o tiene otras deformidades. A continuación, coloque el rotor en el husillo asegurándose de que esté correctamente asentado. Inserte las muestras en el rotor, asegurándose de que los tubos encajen perfectamente en el rotor.

Coloque siempre tubos balanceados opuestos entre sí. Cubra el rotor, asegurándose de que el sello esté hermético. Cierre la tapa de la centrífuga e inicie su programa. Nuevamente, vea el video anterior de centrífugas de JoVE para obtener más información sobre cómo ejecutar un programa de centrífugas.

Permanezca en la centrífuga hasta que haya alcanzado su velocidad máxima. Familiarícese con la ubicación del botón de encendido. Apague el botón de encendido si hay sonidos o vibraciones inusuales para detener la centrífuga inmediatamente. A continuación, evacúe el área inmediata hasta que el rotor se haya detenido. Una vez que se haya detenido, inspeccione las muestras en busca de derrames y el rotor en busca de anomalías o desequilibrios. Si no hubo problemas, espere hasta que la centrífuga haya completado su programa y se haya detenido por completo.

Espere media hora adicional si hay productos químicos formadores de aerosoles. De lo contrario, puede abrir

la centrífuga inmediatamente. Retire las muestras y llévelas de regreso a un área especializada para abrirlas si es necesario. En caso de derrame, limpie la centrífuga inmediatamente. Use el EPP adecuado para cualquier peligro presente y deseche los materiales contaminados de acuerdo con las pautas. No utilice alambres de cepillo abrasivos para limpiar, ya que pueden dañar el rotor. Alerte al personal de emergencia y no intente limpiar la centrífuga si se han derramado peligros que amenazan la vida.

Descontamine el rotor con lejía al 10% para cualquier muestra biológica utilizada en la centrífuga, independientemente de si hay derrame o no. Deje reposar la lejía durante 30 minutos, luego enjuague con etanol al 70% y seque al aire. Por último, retire e inspeccione el rotor en busca de daños y anote su uso en el libro de registro.

Acabas de ver la introducción de JoVE al uso de centrífugas. Ahora debe comprender cómo preparar sus muestras, así como cómo operar y mantener el instrumento.

Gracias por mirar.