1. protocolo general para el uso seguro de la centrífuga
2. Precauciones y manejo de productos químicos peligrosos o materiales infecciosos
3. Situaciones de emergencia y sus medidas de seguridad
una situación de emergencia puede surgir si el rotor funciona mal o si hay un derrame en la centrífuga debido a la rotura del tubo o por mal manejo. En tales situaciones, deben seguirse los pasos siguientes.
4. mantenimiento de la centrifugadora
Nota: el cuerpo de la centrifugadora se hace generalmente de metales que pueden corroer en presencia de humedad, productos químicos o detergentes fuertes. Para el mantenimiento apropiado de la centrífuga, se recomienda seguir cuidadosamente el fabricante ' instrucciones para la limpieza y mantenimiento. Aparte de eso, algunas medidas generales de mantenimiento a tener en cuenta son los siguientes.
Fuente: Robert M. Rioux & Suprita Jharimune, Pennsylvania State University, University Park, PA
de la fuerza gravitacional de la tierra es capaz de se…
1. protocolo general para el uso seguro de la centrífuga
2. Precauciones y manejo de productos químicos peligrosos o materiales infecciosos
3. Situaciones de emergencia y sus medidas de seguridad
una situación de emergencia puede surgir si el rotor funciona mal o si hay un derrame en la centrífuga debido a la rotura del tubo o por mal manejo. En tales situaciones, deben seguirse los pasos siguientes.
4. mantenimiento de la centrifugadora
Nota: el cuerpo de la centrifugadora se hace generalmente de metales que pueden corroer en presencia de humedad, productos químicos o detergentes fuertes. Para el mantenimiento apropiado de la centrífuga, se recomienda seguir cuidadosamente el fabricante ' instrucciones para la limpieza y mantenimiento. Aparte de eso, algunas medidas generales de mantenimiento a tener en cuenta son los siguientes.
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La centrifugación es una de las herramientas más poderosas utilizadas en los laboratorios para la separación de mezclas heterogéneas, pero puede ser peligrosa y, por lo tanto, se deben aplicar precauciones de seguridad.
Una centrífuga hace girar rápidamente las muestras para separar materiales heterogéneos, lo que induce fuerzas centrífugas extremas en las muestras y en el instrumento. Debido a la alta velocidad a la que opera una centrífuga, puede causar lesiones graves al usuario si se maneja incorrectamente. Por lo tanto, se debe tener especial cuidado al usar una centrífuga para evitar derrames y daños al equipo.
Este video ilustrará el mecanismo de una centrífuga y cómo operar y mantener una de manera segura.
Antes de entrar en los detalles de las medidas de seguridad, repasemos rápidamente los conceptos básicos de la centrifugación. Las centrífugas contienen un rotor alojado en un husillo. Por lo general, se pueden instalar rotores de diferentes tamaños en un solo husillo para acomodar diferentes botellas de muestra, tubos o bolsas. Un motor hace girar el rotor a unas RPM o revoluciones por minuto especificadas. Esto, a su vez, imparte la fuerza centrífuga sobre la mezcla heterogénea dirigida lejos del eje de rotación, lo que separa las partículas con diferentes densidades.
Los diferentes tipos de centrífugas funcionan a diferentes RPM: las centrífugas de baja velocidad funcionan a menos de 10,000 RPM, las de alta velocidad hasta 21,000 y las ultracentrífugas hasta 30,000 y más. Cada tipo tiene diferentes rotores que son compatibles con él. Después de la carrera, un sistema de frenado generalmente reduce la velocidad del rotor. En cualquier centrífuga, la alta velocidad deforma el rotor.
En uso normal, volverá a su tamaño anterior. Sin embargo, si la fuerza debida al giro excede la fuerza máxima que el rotor puede manejar, entonces podría deformarse permanentemente. Esto puede provocar grietas, que a su vez pueden provocar fallos graves. Las fallas de la centrífuga, por otro lado, pueden provocar fugas de muestras, lo que puede ser peligroso si se trata de materiales peligrosos y debe manipularse con cuidado. Ahora, le mostraremos cómo preparar muestras y usarlas de manera segura en la centrífuga.
En primer lugar, seleccione los tubos de centrífuga adecuados que sean compatibles con las velocidades de rotación que desea utilizar. Consulta la documentación para conocer los límites del tubo. Los tubos deben estar intactos y libres de grietas. Llene cada uno a no más de 3/4 de su capacidad para evitar derrames. A continuación, asegúrese de que los tubos estén equilibrados y tápalos herméticamente.
Al centrifugar muestras químicas o biológicas peligrosas, tome precauciones especiales. Use el equipo de protección adecuado y prepare las muestras en un entorno de trabajo adecuado, como una campana extractora o una cabina de flujo laminar. Para obtener más información sobre estas características de seguridad, consulte los videos de JoVE sobre las campanas extractoras.
Si es necesario, use una contención secundaria para materiales peligrosos, como un inserto de vidrio o plástico. También se pueden utilizar tubos de seguridad sellados que proporcionan un entorno contenido. Todos deben estar capacitados antes de usar cualquier centrífuga o rotor.
Seleccione un rotor apropiado para la centrífuga. Compruebe que el rotor y su tapa estén limpios y secos y no tengan grietas ni deformidades. Asegúrese de que las juntas tóricas del rotor o la cubierta no estén desgastadas. Además, revise el husillo de la centrífuga para ver si está doblado o tiene otras deformidades. A continuación, coloque el rotor en el husillo asegurándose de que esté correctamente asentado. Inserte las muestras en el rotor, asegurándose de que los tubos encajen perfectamente en el rotor.
Coloque siempre tubos balanceados opuestos entre sí. Cubra el rotor, asegurándose de que el sello esté hermético. Cierre la tapa de la centrífuga e inicie su programa. Nuevamente, vea el video anterior de centrífugas de JoVE para obtener más información sobre cómo ejecutar un programa de centrífugas.
Permanezca en la centrífuga hasta que haya alcanzado su velocidad máxima. Familiarícese con la ubicación del botón de encendido. Apague el botón de encendido si hay sonidos o vibraciones inusuales para detener la centrífuga inmediatamente. A continuación, evacúe el área inmediata hasta que el rotor se haya detenido. Una vez que se haya detenido, inspeccione las muestras en busca de derrames y el rotor en busca de anomalías o desequilibrios. Si no hubo problemas, espere hasta que la centrífuga haya completado su programa y se haya detenido por completo.
Espere media hora adicional si hay productos químicos formadores de aerosoles. De lo contrario, puede abrir
la centrífuga inmediatamente. Retire las muestras y llévelas de regreso a un área especializada para abrirlas si es necesario. En caso de derrame, limpie la centrífuga inmediatamente. Use el EPP adecuado para cualquier peligro presente y deseche los materiales contaminados de acuerdo con las pautas. No utilice alambres de cepillo abrasivos para limpiar, ya que pueden dañar el rotor. Alerte al personal de emergencia y no intente limpiar la centrífuga si se han derramado peligros que amenazan la vida.
Descontamine el rotor con lejía al 10% para cualquier muestra biológica utilizada en la centrífuga, independientemente de si hay derrame o no. Deje reposar la lejía durante 30 minutos, luego enjuague con etanol al 70% y seque al aire. Por último, retire e inspeccione el rotor en busca de daños y anote su uso en el libro de registro.
Acabas de ver la introducción de JoVE al uso de centrífugas. Ahora debe comprender cómo preparar sus muestras, así como cómo operar y mantener el instrumento.
Gracias por mirar.
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Q1: What is the basic mechanism of how a centrifuge separates mixtures?
A centrifuge rapidly spins a rotor containing samples, generating centrifugal force directed away from the axis of rotation. This force causes particles with different densities to separate, with heavier particles moving toward the bottom of the tube. The separation speed depends on particle size and density, making centrifugation much faster than gravity-based sedimentation.
Q2: How should centrifuge tubes be prepared before use?
Select tubes compatible with your centrifuge's maximum RPM and verify limits in the documentation. Inspect tubes for cracks or damage and ensure they are intact. Fill each tube to no more than three-quarters full to prevent spills, then balance tubes and cap them tightly before placing them in the rotor.
Q3: What precautions are necessary when centrifuging hazardous materials?
Wear appropriate personal protective equipment and prepare samples in a fume hood or laminar flow cabinet. Use secondary containment such as glass or plastic inserts for hazardous chemicals or biological samples. Sealed safety tubes provide an additional contained environment. Always ensure proper use of personal protective equipment when handling potentially dangerous materials.
Q4: What rotor inspection steps should be completed before centrifugation?
Verify the rotor is appropriate for your centrifuge and check that it and its cover are clean, dry, and free of cracks or deformities. Inspect O-rings for wear and examine the centrifuge spindle for bending or damage. Ensure the rotor is correctly seated on the spindle and that sample tubes fit snugly without gaps.
Q5: What should you do if unusual sounds or vibrations occur during centrifugation?
Immediately turn off the power button to stop the centrifuge. Evacuate the immediate area and allow the rotor to stop completely before approaching. Inspect samples for spillage and the rotor for abnormalities or imbalances. Do not attempt to restart until the cause is identified and resolved.
Q6: How should a centrifuge be decontaminated after use with biological samples?
Decontaminate the rotor with 10% bleach regardless of whether a spill occurred. Allow the bleach to stand for 30 minutes, then rinse with 70% ethanol and air dry completely. After decontamination, remove and inspect the rotor for damage and document your use in the logbook.
Q7: What is the proper procedure for cleaning up a centrifuge spill?
Clean the centrifuge immediately using appropriate personal protective equipment for any hazards present. Dispose of contaminated materials according to guidelines. Do not use abrasive brush wires, as they damage the rotor. For life-threatening hazards, alert emergency personnel and do not attempt cleanup yourself.
Capítulos en este video
0:04
Overview
0:59
Basics of Centrifugation
2:55
Preparing samples for the centrifuge
4:01
Using and maintaining the centrifuge
6:46
Summary