6.10: Uso correcto de la autoclave

1. desgaste adecuada protección Personal equipo (PPE)

la alta presión y temperatura condiciones encontradas durante el autoclavado plantean posibles riesgos de quemaduras o explosión de calor. PPE apropiado incluye una capa del laboratorio, gafas, guantes y zapatos cerrados; Estos deben ser usados cuando se carga y descarga de materiales de la autoclave. Cuando se trata de muestras líquidas, usar un escudo delantal y cara como PPE adicional.

2. preparación de materiales para cargar

1. identificar Autoclave Compatible y Autoclave incompatibles Material
   aunque autoclave representa un método comúnmente utilizado y económico para la descontaminación, no todos los materiales son adecuados para autoclave debido a la alta presión y temperatura de trabajo. En general, todos los materiales que se evaporan o derretir bajo el vapor de alta presión no son compatibles con esterilización en autoclave. Esto incluye materiales como solventes orgánicos, el plástico poco resistente al calor tales como poliestireno, polietileno y metales, excepto acero inoxidable. Nunca autoclave inflamables, corrosivos, tóxicos, reactivos o radiactivos químicos. Materiales compatibles para el autoclave son Pyrex o de tipo I borosilicato, polipropileno, policarbonato, guantes, acero inoxidable, puntas de pipeta, papel (poner dentro de bolsas de autoclave) y soluciones de medios de comunicación.
Material de embalaje de
2. 
   Tras la identificación de materiales compatible con autoclave, embalaje adecuado también es importante puesto que garantiza seguridad y eficiencia autoclavado. Aquí están los principios básicos cuando los materiales de embalaje:
   1. siempre utilizar un contenedor secundario de polipropileno o de acero inoxidable.
   2. Para muestras líquidas, llenar la cubeta alrededor de ½ completo y aflojar las tapas o cierres de ventilación. Nunca llene los contenedores sobre 2/3 completo con la tapa totalmente apretado.
   3. Inspeccionar el recipiente de cristal para asegurarse de que no hay ningunas grietas. Si las grietas son identificadas, disponer de cristalería en un receptáculo apropiado. Nunca autoclave un vaso de vidrio roto conocido.
   4. Utilice siempre bolsas de autoclave compatible con residuos de paquete. Las bolsas deben tener cintas de indicación en él y debe ser abiertas en los extremos antes de cargar para permitir que el vapor dentro de la bolsa.
   5. No sobrecargue las bolsas o contenedor para permitir suficiente flujo para la completa esterilización de vapor. Deje espacio entre los elementos de.
   6. Don ' materiales incompatibles de la mezcla t.
   7. Nunca coloque objetos afilados en el bolso de la basura.

3. Cargar el Material

1. Compruebe el autoclave ' interior s para hacer que no haya ningún peligro potencial a la izquierda del usuario anterior.
2. Limpiar el desagüe antes de cargar los materiales para permitir la buena circulación.
3. Asegurarse de que las bolsas no toquen las paredes interiores de la autoclave para evitar que se derritan.
4. Líquidos y materiales secos requieren ciclos diferentes y necesitan ser esterilizado por separado.
5. Cierre la puerta firmemente.

4. Funcionamiento de Autoclave

1. solo el personal entrenado debe poder operar autoclaves. Consulte el manual del equipo si es necesario, ya que los protocolos de operación varían entre autoclaves diferentes.
2. Una vez asegurándose de que la puerta del autoclave cerrada firmemente, ajuste la temperatura de esterilización en autoclave a 121 ° C y mantener por lo menos 15 psi de presión.
3. Para establecer el tiempo de la autoclave y el ciclo, deben considerarse los siguientes factores:
   1. recomendaciones de equipos del fabricante ' el manual.
   2. El tipo de material cargado dentro: secas o líquidas.
   3. Las cantidades de materiales cargado.
   4. Forma y tamaño de envase de.
   5. Termoconductividad de envase y materiales.
   6. Propósito de la descontaminación.

5. Descarga del material esterilizado

1. use PPE adecuado como se describe arriba.
2. Asegúrese de que la temperatura y la presión de la autoclave han regresado a un rango seguro.
3. Soporte detrás de la puerta y con cuidado Abra la puerta para liberar todo el vapor sobrante dentro de la autoclave en la sala de.
4. Permitir los materiales dentro de la autoclave reposar 10 min liberar cualquier vapor o aire caliente atrapados dentro del material.
5. No sacuda cualquier material líquido mientras se retira de la autoclave. Si es necesario, etiqueta el material caliente para evitar el calor se quema a una persona que puede ser potencialmente consciente del hecho de que el material ha sido esterilizado.
6. Espere a que el material se enfríe a temperatura ambiente antes de transportar dentro del laboratorio o fuera del laboratorio. En ambos casos, asegúrese de utilizar la contención adecuada para el transporte.
7. Registrar los detalles de los materiales y las condiciones de esterilización en autoclave en un usuario ' s log

El autoclave es uno de los métodos más utilizados en el laboratorio con fines de descontaminación.

Muchos científicos, en particular los que trabajan con muestras biológicas, necesitan equipos y medios esterilizados, y los autoclaves proporcionan una forma rápida y económica de descontaminar materiales. Utilizan vapor a altas temperaturas y presión para matar microorganismos. Sin embargo, debido a estas condiciones extremas, deben usarse con cuidado.

Este video ilustrará cómo funcionan los autoclaves y cómo usarlos correctamente.

En un autoclave, los materiales se calientan con vapor a temperaturas de 121 grados centígrados a presiones de al menos 15 p.s.i. Después de al menos 30 minutos, estas condiciones se deshidratarán y matarán las células.

Los autoclaves pueden esterilizar materiales líquidos y sólidos, pero se deben considerar diferentes configuraciones de funcionamiento. Los líquidos requieren más tiempo que los sólidos para agotar el vapor, con el fin de evitar la ebullición repentina. Además, los volúmenes más grandes de materiales líquidos tardan más en calentarse a la temperatura correcta.

No todos los materiales pueden soportar las temperaturas dentro de un autoclave. Por lo tanto, nunca autoclave nada que se derrita, se queme, sea explosivo o líquidos que se evaporen. Además, no autoclave productos químicos tóxicos o radiactivos.

Ahora, le mostraremos cómo preparar muestras para el autoclave y cómo operar uno.

En primer lugar, seleccione los materiales que va a esterilizar en autoclave y utilice únicamente recipientes e instrumentos compatibles. El Pyrex, el vidrio de borosilicato, el acero inoxidable, el polipropileno y el policarbonato se pueden utilizar para el autoclave.

Otros materiales de laboratorio comunes, como puntas de pipeta y cajas, también son compatibles. El papel se puede esterilizar en autoclave en bolsas compatibles con autoclave.

Los residuos sólidos también se pueden esterilizar en autoclave en una bolsa adecuada. Deje espacio en esta bolsa para permitir que el vapor circule y ate los extremos. Por último, antes de esterilizar en autoclave, asegúrese de crear una pequeña abertura en la bolsa para permitir la entrada de vapor.

Para medios acuosos y otras muestras líquidas compatibles, utilice un recipiente intacto sin grietas. Llene el recipiente aproximadamente hasta la mitad y nunca más de dos tercios de su capacidad.

Para ventilar los gases de un recipiente de líquido, afloje la tapa. Si no hay tapa, cúbrala sin apretar con papel de aluminio para evitar la contaminación del material esterilizado en autoclave.

Coloque todos los materiales en un recipiente secundario hecho de polipropileno o acero inoxidable. Separe los materiales sólidos y líquidos para esterilizarlos en autoclave. Deje espacio entre los materiales y no llene demasiado el recipiente.

Por último, coloque un trozo de cinta adhesiva de autoclave en todos los materiales. Esta cinta tiene indicadores sensibles a la temperatura que se volverán negros si se alcanza una temperatura suficiente.

Cuando utilice un autoclave, use el equipo de protección personal adecuado para protegerse contra los riesgos de alta temperatura y presión. Esto incluye gafas de seguridad EPP estándar, batas de laboratorio, zapatos cerrados y guantes resistentes al calor. Use un delantal y un protector facial cuando manipule muestras líquidas.

En el autoclave, primero abra la puerta y verifique si hay peligros en el interior. Cargue los materiales líquidos y secos por separado, ya que requieren diferentes ciclos de autoclave.

Para evitar que se derrita, asegúrese de que los materiales no toquen las paredes. Asegure un buen flujo de calor manteniendo un espacio suficiente entre los materiales. Por último, cierre y selle la puerta.

Los diferentes autoclaves tienen diferentes instrucciones de funcionamiento. Los ciclos se pueden configurar configurando manualmente la temperatura y el tiempo, o seleccionándolos de una lista preestablecida. En general, use los ciclos recomendados para el tipo de material que está descontaminando.

Existe una variedad de ciclos para sólidos y líquidos, así como para diferentes cantidades de material y residuos que se van a esterilizar en autoclave. Cuando ejecute un ciclo, asegúrese de que la temperatura haya alcanzado al menos 121 grados Celsius y la presión al menos 15 p.s.i.

Después de que termine el ciclo, asegúrese de que la presión haya vuelto a cero y que el autoclave se haya enfriado. Abra la puerta con cuidado para dejar salir el vapor sobrante. Luego, deje reposar los materiales durante 10 minutos para liberar los gases calientes. La cinta de autoclave ahora debe tener rayas negras o decir autoclave, aunque esto no es una garantía de que se haya llevado a cabo la esterilización.

Con el EPP adecuado, retire los materiales, asegurándose de no agitar ninguna muestra líquida. Anote su uso en el registro, incluido el tipo de sustancias y cualquier circunstancia especial si se encuentra. Finalmente, transporte los materiales a un área segura o a una campana de flujo laminar para enfriar.

Acabas de ver la introducción de JoVE a los autoclaves. Ahora debe comprender qué materiales se pueden esterilizar en autoclave, cómo prepararlos y cómo usar el instrumento de manera segura. ¡Gracias por mirar!