Tomografía fotoacústica para obtener imágenes de sangre y lípidos de la Aorta Infrarrenal

El siguiente procedimiento describe los métodos necesarios para configurar vpAT para la toma de imágenes sanguíneas y lipídicas de la aorta infrarrenal en ratones con apolipoproteína-E deficiente (apoE^-/-).

1. Acoplamiento de ultrasonido láser

1. Obtenga un láser de oscilador paramétrico óptico pulsado Nd:YAG y un sistema de ultrasonido. Adquiera un generador de pulsos, 1 cable BNC y un conector D conectado a dos cables BNC.
2. Con la configuración del conector D, conecte el cable BNC 'Fire' al puerto A del generador de impulsos y 'Q-switch' al puerto B del generador de pulsos. Por último, conecte un cable BNC desde el puerto C para "activar" en la parte posterior del sistema de ultrasonido.
3. Alinee el cable de fibra óptica con el láser y conecte los extremos de fibra a los lados del transductor de ultrasonido de 40 MHz.
4. Ajuste el retardo de los puertos A, B y C a los valores enumerados aquí (puerto A: 0.00000000, puerto B: 0.00021440, puerto C: 0.00000910). Ajuste los puertos A y B a la señal invertida y al puerto C en la señal normal.

2. Preparación de animales y adquisición de imágenes

1. Anestetizar un ratón apoE^-/- usando 3% de isoflurano en una cámara de inducción de anestesia. Una vez que el animal es anestesiado mover el ratón a un cono nasal para entregar 1-2% de isoflurano.
2. Aplique lubricante para los ojos en los ojos de los animales para evitar la desecación corneal. Pegue las patas del ratón a los electrodos integrados en la etapa calentada para monitorear la respiración y la frecuencia cardíaca del animal. Por último, inserte la sonda rectal para controlar la temperatura corporal.
3. Aplicar crema depilatoria para eliminar el vello del abdomen del animal. Limpie después de 30 s con una almohadilla de gasa.
4. Coloque el transductor de ultrasonido en el abdomen del animal y localice la aorta infrarrenal. La vena renal izquierda y la trifurcación aórtica en la arteria de la cola son dos puntos de referencia que ayudarán al usuario a localizar esta zona.
5. Ejecute el láser para emitir 1100 nm de luz para apuntar a la sangre seguida de 1210 nm de luz para el lípido objetivo. Utilice gafas de seguridad láser adecuadas cuando el láser esté en uso.