Ensayo de respuesta fotomotora: un método para medir la respuesta conductual de las larvas de pez cebra a un cambio repentino en las condiciones de iluminación

- Para empezar, transfiere 10 embriones de pez cebra, con la ayuda de una pipeta de transferencia, a un vaso de precipitados lleno de 20 mililitros de agua. Ahora, cultive los embriones a 28 grados centígrados, bajo el ciclo de luz y oscuridad apropiado requerido para un experimento. A continuación, transfiera las larvas a placas de pocillos. Asegúrese de que cada pozo contenga una larva para dar suficiente espacio para nadar.

Ahora llene completamente cada pozo con agua. Coloque la placa de pocillo en la cámara de registro de comportamiento y rastree el movimiento de las larvas utilizando un software de seguimiento de video. Las larvas exhiben un mayor movimiento en la oscuridad y una disminución del movimiento en la luz cuando se exponen a un ciclo anormal de luz y oscuridad debido al aumento de los niveles de estrés. Calcular la diferencia entre la distancia media recorrida durante el último minuto de un periodo inicial y el primer minuto del periodo siguiente nos indica la respuesta fotomotora de los peces.

En este protocolo, examinaremos la respuesta fotomotora en larvas de pez cebra y pececillo cabeza gorda expuestas a la cafeína. Primero, coloque la placa de pocillo que contiene los peces experimentales en la cámara de registro de comportamiento. A continuación, abra el protocolo de seguimiento desarrollado anteriormente. En el visor de seguimiento de vídeo, asegúrese de que todas las larvas estén visibles, de que solo haya una larva en cada pocillo y de que los pocillos estén alineados con las áreas de observación definidas.

A continuación, haga clic en Experimentar y ejecutar. Especifique el nombre y la ubicación de almacenamiento de los datos y haga clic en el icono Varias imágenes en vivo para resaltar todas las áreas de visualización predefinidas. Finalmente, cierre el panel de la cámara de grabación y haga clic en Fondo seguido de Inicio en el monitor de la computadora.