Transfección in vitro basada en magnetofelicción: una técnica asistida por campo magnético para administrar plásmidos en células neuronales primarias de ratón utilizando nanopartículas magnéticas

Comience con ADN plasmídico fluorescente que codifica proteínas o suspensión de ADNp en el medio. Agregue nanopartículas magnéticas biocompatibles recubiertas de polímeros catiónicos a la suspensión de ADNp e incube.

Los polímeros catiónicos cargados positivamente interactúan electrostáticamente y se conjugan con el ADNp cargado negativamente, lo que da como resultado la condensación del ADNp y la formación de "poliplexores magnéticos" con una carga positiva general.

Ahora, transfiera la mezcla de polyplex a una placa de pocillos múltiples que contenga un cultivo de células neuronales primarias de ratón adheridas. Monte la placa de pocillos múltiples sobre una placa magnética e incube.

El campo magnético generado por la placa magnética hace que los poliplexores se sedimenten y se acumulen sobre la superficie de la célula neuronal. Este estrecho contacto con la superficie celular facilita la unión no específica de poliplexos cargados positivamente a proteoglicanos asociados a la membrana celular cargados negativamente.

Posteriormente, los poliplexos se internalizan a través de la endocitosis, un proceso en el que las regiones locales de la membrana celular se invaginan y se pellizca