Utilización de matrices de electrodos múltiples para medir la fisiología sináptica en esferas de cocultivo en 3D

Tome una matriz de electrodos múltiples estéril o MEA, un dispositivo que registra la actividad eléctrica de las células objetivo.

Agregue una solución de polímero al MEA e incube.

El polímero recubre la superficie del MEA, aumentando así la propiedad de atracción de agua de la superficie.

Retire el exceso de polímero y lave con agua desionizada.

Agregue matriz extracelular, o ECM, e incube para permitir que cubra el MEA. Retire el exceso de ECM.

A continuación, agregue las esferas de cocultivo 3D que comprenden neuronas y astrocitos en un medio adecuado.

Incubar para permitir que las esferas se adhieran a la superficie del MEA.

Coloque el MEA en una etapa de cabeza con temperatura controlada de un sistema MEA y registre la actividad eléctrica espontánea a través de los electrodos.

La actividad eléctrica medida corresponde a la comunicación en las uniones neuronales dentro de la esfera.

Comience recubriendo la superficie de cada matriz de electrodos múltiples o MEA con 1 milímetro de poliornitina para que la superficie sea hidrófila e incube a 37 grados Celsius durante un mínimo de cuatro horas. Después de la incubación, retire la poliornitina y lave la superficie de cada MEA con agua desionizada. Luego, agregue 1 mililitro de matriz extracelular y regrese a la incubadora por un mínimo de cuatro horas.

Cuando esté listo, retire la matriz extracelular, luego aplique las esferas en 1,5 mililitros de medio sobre la superficie MEA, asegurándose de que las esferas estén colocadas en la parte superior de la matriz de electrodos. Deje adherir durante dos días. Para medir la actividad eléctrica de las esferas neuronales, coloque el MEA en una platina de cabeza con temperatura controlada.